褐飞虱遗传多样性及其海藻糖合成酶基因功能的分析

来源 :中山大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:whlwzn
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
褐飞虱(Nilaparvata lugens)是我国和许多亚洲国家当前水稻上的首要害虫,自20世纪70年代以来时有暴发,严重影响稻谷产量。褐飞虱有远距离迁飞的特性,每年3-4月份,褐飞虱开始从境外迁入我国。因此,褐飞虱的迁飞特性是造成其在我国暴发的根本原因。本课题以褐飞虱的迁飞为主线,从两个方面开展相关研究,包括(1)利用高通量Solexa测序技术,对5个地理种群,包括越南河静、菲律宾内湖、广东珠海、安徽潜山、云南思茅的褐飞虱基因组上<5%的序列进行测序,对其共有的单核苷酸多态性位点(single nucleotidepolymorphism,SNPs)的存在方式和频率进行分析,构建褐飞虱种群内和种群间的遗传分化关系,探讨此方法在研究季节性长距离迁飞昆虫褐飞虱的迁飞过程的可行性;(2)利用饲喂法RNA干扰(RNAinterference,RNAi)技术研究褐飞虱飞行能量相关基因海藻糖合成酶(Trehalose phosphate synthase,TPS)的功能。论文取得的主要结果如下:   1.建立了对基因组序列未知昆虫的经济有效的高质量单核苷酸多态性位点的获得方法。对5个褐飞虱种群全基因组序列进行测序的费用是极其昂贵的,本研究建立了选取基因组上<5%的基因组序列进行测定的方法,每个种群只测定1G的数据量。测序质量的评估表明该方法准确性高,能获得高通量的SNPs位点信息。   2.构建了褐飞虱种群内和种群间的遗传分化关系。   1)将5个地理种群中满足覆盖度大于等于50倍覆盖度及至少一个种群的SNP的频率(minor allele frequency,MAF)>0.05或MAF≠0的SNPs位点做两两种群间的欧式距离分析,结果显示,在大于等于50倍覆盖度时,广东珠海、安徽潜山、及云南思茅这三个地理种群的相对距离最近,菲律宾与其它四个种群间的相对距离最远。   2)聚类分析的结果表明,安徽潜山种群与广东珠海种群在MAF>0.05条件选择与否的情况下都聚为最近的一支,越南河静种群与云南思茅种群最靠近,表明这两个种群关系最近;而菲律宾内湖种群处于聚类的最外端,与其它四个地理种群的差异最大,比越南种群与其它三个国内的地理种群更远。   3)在5个种群中,种群间的遗传分化系数(coefficient of gene differentiation,Fst)的值在0.0046-0.0088之间,即绝大部分变异存在于各种群内,说明种群间遗传分化程度非常低。Fst的结果与5个地理种群欧式距离的结果和趋势一致,即菲律宾内湖种群与其它四个地理种群的Fst值都是最大的,由Fst间接换算的基因流Nm在5个地理种群之间达到了28-54之间,远大于1,说明5个种群间的基因流较大。   3.利用饲喂法RNAi技术,发现海藻糖合成酶对褐飞虱的生长发育有重要作用。RNAi目前已经被广泛地用来研究昆虫基因的功能,其靶标的特异性及高效性也使其成为控制害虫的新方法。在本研究中,首先从褐飞虱中成功克隆到了海藻糖合成酶基因,该基因全长3235bp,编码一个807个氨基酸的蛋白。该基因主要在脂肪体中表达,在中肠和卵巢也有微量表达。定量PCR的结果显示TPS基因在褐飞虱若虫至成虫阶段都有恒定且持续的表达。通过对褐飞虱持续饲喂NlTPSdsRNA的方式,发现在对3龄褐飞虱若虫饲喂0.5μg/μl dsRNA(终浓度)2天后其靶标基因的表达即有了明显的下降,在取食4天、7天及10天时NlTPS的表达依然被抑制,并且海藻糖合成酶的酶活在饲喂NlTPS dsRNA2天后也出现了下降,到第7天时,其酶活下降到初始酶活的一半;目标基因表达水平的显著下降对褐飞虱的生长发育产生了重要影响,产生了致死表型,在饲喂靶标基因dsRNA2天、4天、7天和10天后的平均存活率为75.56%、64.44%、55.56%和40.00%,与对照组之间的存活率存在显著的差异。
其他文献
  通过冷冻干燥、水热反应和高温碳化处理制得Si@C/G复合材料.采用SEM、TEM、TGA、XRD、Raman等对材料微观形貌、结构及其组分进行了表征.研究表明具有核壳结构的蔗糖热解
会议
  以天然鳞片石墨为原料,分别采用Staudenmaier法和Hummers法制备氧化石墨,利用热还原以及超声剥离手段制备石墨烯.通过X射线衍射,扫描电子显微镜,透射电子显微镜和拉曼光
会议
长久以来,药店零售行业的发展很大程度上都得益于医院高药价所形成的市场差价。随着近年来国家推行的“医药分开”政策逐渐成熟,药品零差率成为大势所趋,这就为社会零售药店
  对常用接骨板材料的性能做了分析对比,与其他材料相比,炭/炭复合材料与人体有着良好的生物相容性和力学相容性,在结构、弹性模量、孔隙度和密度上均与人骨接近。作为新一代
蓖麻基润滑油具有良好的生物降解性,能够通过微生物的作用分解成小分子物质,从而减少润滑油对环境的污染。因此,从自然环境中筛选高效降解菌并构建高效菌群,对于润滑油污染的治理具有重要意义和应用前景。本课题以大港油田的储油罐和油井附近的油污土壤为实验材料,通过系统的富集、分离、筛选工作,获得能够降解蓖麻基润滑油的菌株。实验中利用传统重量法和改良重量法对菌种进行降解率测定,并利用气相-质谱(GC-MS)分析
膜分离过程作为一门新型的分离、浓缩、提纯及净化高新技术,具有能耗低、单级分离效率高、过程简单、不污染环境等优点,它己成为解决当代能源、资源和环境污染等问题的重要高
石墨由于其化学稳定性、高热导率、低热膨胀系数、良好的自润滑及合适硬度等特性而被用做冷轧硅钢连续退火炉炉底辊材料。由于退火炉中温度高、气氛复杂,这对对碳套材质提出
  本文采用乙二醇(EG)同时作为溶剂和还原剂,仅通过一步溶剂热的过程之后经过冷冻干燥得到具有超低密度(0.02g/cm3)、高电导率(330S/m)、良好的柔性以及较高比表面积(207~23
  随着电动汽车的发展、智能时代和可再生能源利用时代的来临,人们对高性能锂离子电池的需求日℃增长,具有高理论比容量的IA族等活性电极材料已经引起广泛关注。然而,这类材料
会议
近日,2017中国(大连)国际服装纺织品博览会(以下简称“大连服博会”)新闻发布会在上海举行。在以信息化为代表的科学技术发展、产业边界不断被打破成为常态的今天,将于9月22~