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目的研究EGFR单克隆抗体尼妥珠单抗(h-R3,泰欣生)单独作用及联合Y射线照射对人食管癌Ec109细胞生长的抑制作用及尼妥珠单抗对食管癌细胞的放射增敏效应,探讨两者协同抑瘤作用产生的机理,为临床食管癌的尼妥珠单抗靶向治疗和放射治疗的联合应用提供理论基础。方法尼妥珠单抗于体外作用于人食管癌Ec109细胞,作用12h后进行4Gy137Csγ射线照射,用MTT方法、流式细胞仪(FCM)、彗星分析(SCGE)检测Ec109细胞的生长曲线、抑制率、细胞周期、细胞凋亡及DNA损伤。本实验将尼妥珠单抗(h-R3)用不含小牛血清的培养基配制含h-R3浓度分别为0.1μ g/ml、0.5μg/ml、5μg/ml、10μg/ml、25μg/ml、50μ g/ml、100μg/m17个不同浓度梯度的带药培养基,将人食管癌Ec109细胞分别于上述处理后的培养基中培养6、12、48、72、96h后检测吸光度(A)值,绘制细胞生长曲线图,并计算细胞生长的抑制率：生长抑制率(%)=(1-实验组A值/对照组A值)×100%。筛出最佳药物浓度后,设空白对照组(不做任何处理)、h-R3作用组、单独照射组(137Csγ射线照射源4Gy照射,剂量率为0.75Gy/min)和h-R3与照射联合组(h-R3作用12h后进行4Gy照射),培养48h后上流式细胞仪检测不同组别细胞周期、细胞凋亡,彗星实验检测DNA损伤情况。结果1.食管癌Ec109细胞生长曲线：尼妥珠单抗单药对Ec109细胞的生长具有抑制作用,并在一定浓度范围内呈浓度依赖性,当浓度达到25μ g/ml抑制率不再随浓度增加而相应的明显增加。照射对Ec109细胞的亦具有抑制效应,联合照射组的抑制效应最强,高于单独用药组和照射组。2.细胞周期、细胞凋亡：与空白对照组相比,h-R3单药组、单独照射组及联合照射组Ec109细胞停留在G2期的细胞增加(P<0.05)。其中以联合组G2期细胞所占比例最高(31.67%),G1期细胞最少。h-R3和照射都可诱导细胞的凋亡,联合组凋亡率最高(23.62%),较h-R3单药组(12.40%)、单独照射组(16.44%)具有增加凋亡的趋势(P均<0.05),h-R3与照射对Ec109细胞凋亡有协同作用,3.DNA损伤情况：彗星分析检测彗星尾部DNA百分含量(TDNA%)、尾矩(TM)、Olive尾矩(OTM),与其他实验组比较,尼妥珠单抗联合照射组以上指标差异均具有统计学意义(P<0.05),DNA损伤水平最高。结论尼妥珠单抗单独用药对Ec109细胞具有明显抑制生长,并在一定浓度范围内呈剂量依赖性。尼妥珠单抗与照射联合可增强抑瘤作用、加剧DNA损伤、促细胞凋亡,提示尼妥珠单抗与Y射线照射联合后对食管癌细胞的抑瘤作用具有一定程度的协同效应。