新型暂时性贲门金属支架治疗犬贲门失弛缓症的实验研究

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第一部分犬贲门失弛缓症模型的建立目的:建立犬贲门失弛缓症模型,为新型暂时性贲门金属支架治疗贲门失弛缓症的实验研究提供条件。方法:成年毕格犬24条,内镜引导下将十四烷基-二甲基-苄基氯化铵(benzyl-dimethyltetradecylammonium chloride, BAC, 4 mmol/L, 12 mL)环周注射入食管下括约肌(lower esophageal sphincter, LES)。观察BAC处理后实验动物的临床表现。BAC药物处理前和处理后6 mon分别进行食管测压和计时食管钡剂造影(timed barium esophagogram, TBE),以评价建模是否成功。结果:BAC处理前和处理后实验犬LES静息压具有非常显著的统计学差异(22.88±3.13 mmHg vs 47.14±6.12 mmHg;P < 0.001)。处理前实验犬TBE显示第5 min钡剂宽度、高度和乘积分别为0.96±0.55 cm、3.87±2.19 cm及4.55±3.74 cm2,处理后分别为3.04±0.47 cm、9.74±1.33 cm及29.39±4.35 cm2,组间比较均有非常显著的统计学差异(均为P < 0.001)。处理后进食减少发生率为62.5%(15/24),返食(呕吐)发生率为50% (12/24),体重下降发生率为54.2% (13/24)。实验期间未发生实验动物死亡事件。结论:采用内镜下BAC药物LES环周注射法可建立较理想的贲门失弛缓症犬模型。第二部分新型暂时性贲门金属支架治疗犬贲门失弛缓症的效果目的:探讨新型暂时性贲门金属支架治疗犬贲门失弛缓症的疗效和并发症情况,研究支架取出后不同随访时间点的食管贲门段组织病理学变化特征。材料与方法:采用贲门注射十四烷基-二甲基-苄基氯化铵(benzyl-dimethyltetradecylammonium chloride, BAC, 4 mmol/L, 12 mL),对24条实验用毕格犬进行贲门失弛缓症建模工作,共成功建模24条并随机分为对照组(n=12)、实验组(n=12),分别置入普通食管支架和新型暂时性贲门金属支架;支架留置四天后取出。于造模前、造模后和支架取出后1 wk、1 mon、3 mon及6 mon,分别进行食管测压和计时食管钡剂造影(timed barium esophagogram, TBE),并于支架取出后每一观察时间点各处死三条实验犬,取食道贲门段作病理组织学检查。结果:支架的置入/取出和随访检查均顺利实施。两组均未发生食管穿孔及食管严重撕裂。与对照组相比较,实验组支架移位发生率较低(实验组1例;对照组5例),实验组食管下括约肌(lower esophageal sphincter, LES)压力降低更显著(支架取出后6 mon具有显著性组间差异,p = 0.027),实验组TBE 0~5 min钡柱乘积差更大(支架取出后3 mon时具有显著性组间差异,P = 0.009)。鼠抗- PCNA单克隆抗体免疫组化染色显示粘膜上皮层增生性炎症反应均在2-4 wk内达峰值,无组间统计学差异。鼠抗α- SMA单克隆抗体免疫组化染色均显示粘膜下层平滑肌增生均在2-4 wk内达峰值,无组间统计学差异。Masson三色法染色显示粘膜下层胶原纤维增殖活性逐渐增高并于3 mon时趋于稳定状态,无组间统计学差异。结论:在本实验中,新型暂时性贲门金属支架治疗犬贲门失弛缓症安全有效,疗效优于普通食管支架,但有待更大样本量和更长随访时间的基础实验研究和临床研究。支架放置的合适时间问题需要进一步探讨。与拟定的TBE其他观测变量相比,采用TBE 0~5 min“乘积差”与采用LES静息压的评价结果较为一致,二者相关性较好。
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