【摘 要】
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超重力技术目前在生物化工等方面均有应用,在植物上利用超重力进行育种多集中在生理生化水平上,在分子研究水平上的相关研究鲜有报道。故本研究利用超重力胁迫平邑甜茶2月龄幼苗,测定其生理生化相关变化、采用石蜡切片法观察其叶片解剖结构、利用转录组学分析其差异表达基因的富集及钙在超重力胁迫平邑甜茶幼苗过程中的作用机制进行初步探索,以期多方面解释超重力胁迫对植物的影响并揭示钙与超重力之间的作用机制。研究结果如下
【基金项目】
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山西省1331成果转化培育项目(2020CG027);
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超重力技术目前在生物化工等方面均有应用,在植物上利用超重力进行育种多集中在生理生化水平上,在分子研究水平上的相关研究鲜有报道。故本研究利用超重力胁迫平邑甜茶2月龄幼苗,测定其生理生化相关变化、采用石蜡切片法观察其叶片解剖结构、利用转录组学分析其差异表达基因的富集及钙在超重力胁迫平邑甜茶幼苗过程中的作用机制进行初步探索,以期多方面解释超重力胁迫对植物的影响并揭示钙与超重力之间的作用机制。研究结果如下:1.平邑甜茶幼苗叶片中叶绿素含量、脯氨酸含量、可溶性蛋白含量、细胞膜透性、丙二醛含量和平邑甜茶幼苗体内抗氧化酶活性在超重力胁迫下均发生变化,且在T2(5000 g×6 h)和T4(10000 g×6 h)处理下含量显著升高且与对照存在显著性差异。2.对CK、T2、T4转录学分析得出,差异表达基因在GO功能分析主要富集在叶绿素和金属离子结合;在KEGG功能分析主要富集在果糖和甘露糖代谢及甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢途径;对差异表达基因热图分析发现随超重力胁迫强度增加其表达量呈先上升后下降的变化趋势;差异表达基因经NCBI进行BLAST后发现,差异表达基因主要为生长素应答蛋白、乙烯反应转录因子、NAC域类转录因子及WRKY转录因子同时qT-PCR结果与转录组结果基本一致。3.外源喷施钙试剂对超重力胁迫的影响为:对T2(5000 g×6 h)和T4(10000 g×6 h)处理喷施不同浓度的CaCl2可以不同程度的缓解超重力胁迫对平邑甜茶幼苗造成的伤害,以喷施15 mmol·L-1CaCl2效果最佳;喷施不同浓度的EGTA会加重超重力胁迫对平邑甜茶幼苗造成的伤害,其中25 mmol·L-1抑制效果最明显;外源喷施钙试剂对差异表达基因起正调控作用,差异基因的表达模式于喷施浓度和超重力胁迫强度有很关。4.超重力胁迫提高了平邑甜茶幼苗叶片中钙元素的含量,同时超重力胁迫使叶片中钙元素主要分布在叶脉附近;外源喷施钙试剂改变了平邑甜茶幼苗叶片钙元素含量,同时使钙元素由分布在叶脉附近向叶边缘集中。
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