外源性bFGF联合定志丸加减对豚鼠形觉剥夺性近视巩膜重塑的研究

来源 :陕西中医药大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:lcxlllwho
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目的:探讨外源性b FGF联合定志丸加减对形觉剥夺性近视形成过程中巩膜重塑的影响。方法:(1)将50只3周龄健康雄性花色豚鼠随机分为5组,每组10只:A组为空白对照组,B组为FDM模型组,C组为FDM+定志丸加减灌胃组,D组为FDM+b FGF球后注射组,E组为FDM+b FGF联合定志丸加减组。(2)除空白对照组外,其余各组均予半透明乳胶眼罩不间断遮盖豚鼠左眼3周,确定成功建立形觉剥夺近视(FDM)模型后,于实验第4周开始对C、D及E组豚鼠采取为期三周的药物干预:其中C组定志丸加减灌胃1ml/100g,每天一次,共21次;D组行球后Tenon’s囊下球后注射b FGF,每周一次,共三次;E组定志丸加减灌胃每天一次,球后b FGF注射每周一次。(3)实验第1天、14天、21天、28天、35天时间点,由同一名专业技术人员完成屈光度D(diopter)及眼轴AL(axial length)的测量,并记录数据。于实验第22天,即造模成功的第一天,第43天即最后一次测量结束使用10%的水合氯醛溶液随机抽取的动物处死,取后极部巩膜、脉络膜、视网膜,制备组织病理切片,分别进行HE染色及masson染色,对比观察造模前后及药物干预后各组在光学显微镜下各层厚度的改变及巩膜胶原纤维在数量及排列上的差异。(4)用Digimizer图像分析软件测量光镜下HE切片中央区域巩膜厚度。结果:(1)形觉剥夺3周后模型组巩膜胶原纤维排列紊乱,纤维间隙变大,板层结构不清,胶原纤维部分或完全溶解,巩膜稍变薄。(2)形觉剥夺6周后,模型组巩膜明显变薄,视网膜、脉络膜稍变薄,胶原纤维分裂、溶解,胶原纤维间隙大,数量稀疏,排列紊乱;定志丸加减灌胃组巩膜厚度无明显改变,胶原纤维轻度紊乱,可见部分胶原间隙;b FGF注射组巩膜及脉络膜厚度无明显变化,视网膜颗粒层清晰,厚度正常,巩膜胶原纤维轻度紊乱;定志丸加减联合b FGF组各层厚度无明显变化,胶原纤维排列整齐。(3)与空白组豚鼠巩膜厚度(104.4±2.31um)比较,3周模型组(99.14±1.83um)巩膜厚度明显变薄,差异有统计学意义(P<0.01);6周模型组(93.47±2.22um)与3周模型组比较,巩膜明显变薄,差异有统计学意义(P<0.01);定志丸加减灌胃组(97.97±2.29um)及b FGF注射组(98.44±1.92um)与6周模型组(93.47±2.22um)比较巩膜均较厚,差异均有统计学意义(P<0.01);定志丸加减灌胃组与b FGF注射组巩膜厚度差异不明显,无统计学意义(P>0.05);联合组(101.36±2.47um)与定志丸加减组、b FGF注射组、比较巩膜较厚,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:(1)半透明眼罩法阻挡光线到达视网膜、严重破坏动物形觉,可成功建立形觉剥夺性近视(form deprivation myopia,FDM)。(2)随着形觉剥夺周期延长,光镜下巩膜组织形态学随其屈光及眼轴变化而改变,提示该屈光度变化主要由眼轴过度延长所致,而眼轴的变化是则巩膜重塑的结果。(3)局部注射外源性b FGF联合内服定志丸加减方,有效控制巩膜重塑,具有明显抑制或延缓近视发生及发展作用。
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