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目的:在本实验室以往有关四逆散能诱导脑中某一内源性生理物质的峰面积明显升高的研究基础之上,通过进一步研究,达到确定结构的目的。方法:1.基于UPLC/Q-TOF-MS的四逆散冻干粉诱导的大鼠脑脊液内源性生理物质的分析与特征性标志物的筛选选用SD大鼠10只,随机将其分为空白组与给药组,每组5只。给药组的大鼠按4.9g/kg剂量,经灌胃途径,给予四逆散的冻干粉,每天1次,连续7天。空白组的大鼠给予同体积的水。于末次给药后5h后,经枕骨大孔分别抽取大鼠的脑脊液,将每只大鼠的脑脊液单独收集,处理后,将上述实验空白组和给药组大鼠脑脊液,利用UPLC/Q-TOF-MS分析,进行选择配对最小二乘判别分析和数据统计分析。筛选出发生显著变化的脑脊液内源性生理物质。2.基于UPLC/Q-TOF-MS的四逆散冻干粉诱导的大鼠脑脊液内源性生理活性物质的的结构鉴定利用UPLC/Q-TOF-MS对上述实验筛选得到的脑脊液中内源性生理物质进行结构鉴定。结果:1.基于UPLC/Q-TOF-MS的四逆散冻干粉诱导的大鼠脑脊液内源生理活性物质的分析特征性标志物的筛选1.1基于UPLC/Q-TOF-MS的四逆散冻干粉诱导的大鼠脑脊液内源性生理物质数据的分析实验结果表明,与空白组比较,给药组大鼠脑脊液内源性生理物质的峰的个数与空白组相同、同一峰的面积之间大小有差异。1.2.基于UPLC/Q-TOF-MS的四逆散冻干粉诱导的大鼠脑脊液内源生理活性物质的特征性标志物筛选实验结果表明,空白组与给药组的大鼠脑脊液的主要成分的保留时间(tR)、质谱正离子模式下的有12个成分;与空白组比较,给药组大鼠脑脊液内源性生理物质在保留时间8.59min处的峰面积显著升高(p<0.05);在保留时间 6.90min、12.56min、16.21min、16.74min、16.95min 处的峰面积显著降低(p<0.05)。2.基于UPLC/Q-TOF-MS的四逆散冻干粉诱导的大鼠脑脊液内源性生理活性物质的结构鉴定实验结果表明,基于UPLC/Q-TOF-MS(MasslynxV4.1软件等)的四逆散冻干粉诱导大鼠脑脊液内源性生理物质的分子式为C16H35NO2。结论:1.四逆散没有诱导大鼠脑脊液生理物质的种类发生变化,而是使某些内源性生理物质的峰面积大小发生改变。2.四逆散诱导的大鼠脑脊液内源性生理物质的分子式为C16H35NO2。初步推测为鞘氨醇类物质。