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环境雌激素(Environmental estrogens,EEs)是一种具有雌激素效应,在生物体内模拟雌激素,并通过相应受体介导而对生物体基因转录造成影响的一类化合物。雌激素受体(Estrogen receptor)与雄激素受体(Andorgen receptor)是核受体超家族的成员,介导性激素信号传导,参与性腺发育、成熟等生理过程。弓背青鳉(Oryzias curvinotus)作为湛江本地红树林主要种,具有繁殖力强、世代周期短、广盐性等特点,具有开发为模式生物的潜力。本研究对弓背青鳉进行了RT-qPCR的内参基因筛选;初步探究了弓背青鳉雌、雄激素受体基因表达特征与功能。同时为了评估EEs给生物体带来的潜在危害风险,筛选出合适的EEs监测生物标志物,本研究对雌二醇(E2)处理24 h弓背青鳉仔鱼进行转录组测序,并筛选出显著上调基因,评估其对雌激素处理的响应特性及对双酚A处理的敏感程度。主要结果如下:1、对弓背青鳉进行RT-qPCR内参基因的筛选,通过RefFinder预测,结合geNorm、NormFinder和Bestkeeper分析,结果显示使用eef1β和rps4x两个管家基因作为不同组织、不同胚胎发育阶段和不同EEs处理的RT-qPCR内参基因,可以获得更加准确的目的基因定量水平。通过克隆获得弓背青鳉雌激素受体基因er共有三种亚型,雄激素受体基因ar共有两种亚型,在6种组织(眼、肌肉、脑、肝脏、性腺和鳃)中,三种er均主要在肝脏和性腺有高表达;两种ar在各组织中均有分布,其中arα在眼睛、肝和性腺高表达;arβ则仅在性腺高表达。在10个胚胎发育阶段(1细胞期、卵裂期、囊胚期、原肠胚、16肌节期、发眼期、脊索空泡化完成期、心脏完成期、脾发育期和出膜期)中,er和ar具有不同的表达特征。2、弓背青鳉仔鱼er和ar分别对不同EEs处理有不同的响应表达特征,各浓度(2μg/L、20μg/L和200μg/L)E2能上调erα和erβ1表达,erβ2则表达下调;中低浓度E2诱导arα上调,高浓度则使其下调,各浓度E2均使arβ下调。各浓度(50 ng/L、500 ng/L、5μg/L、50μg/L)双酚A均能使erα表达上调,而erβ2只在较高浓度(500 ng/L、5μg/L、50μg/L)上调,各浓度双酚A均使erβ2表达下调;此外,arα在较高浓度(50 ng/L、500 ng/L、5μg/L、50μg/L)表达上调,arβ仅在5μg/L浓度上调。3、通过对E2处理弓背青鳉仔鱼转录组分析,发现2μg/L的E2会对弓背青鳉仔鱼的氨基糖代谢、心肌功能、光转导、转录后剪接以及肾素-血管紧张素系统造成影响。通过选取E2诱导显著上调的差异基因卵黄蛋白原(vtg)和卵壳前体蛋白(chg),并评估其对EEs的响应敏感度,结果显示,不同浓度(2μg/L、20μg/L和200μg/L)下雌二醇能诱导vtg和chg上调,然而两者对不同浓度(50 ng/L、500ng/L、5μg/L、50μg/L)双酚A响应有差异,在50 ng/L双酚A处理下chgHm显著上调,而chgH和chgL则在各浓度双酚A影响下表达下调;vtg1仅在500 ng/L浓度下上调,vtg2则在较高浓度(500 ng/L、5μg/L、50μg/L)上表达下调。chgHm相对chgH、chgL、vtg1和vtg2更适合作为EEs的环境监测生物标准物。研究结果,为阐明弓背青鳉雌、雄激素受体的功能与相关分子机制奠定了基础。同时为评估环境雌激素的潜在毒性风险,开发本地红树林EEs环境生物标志物提供可参考数据。