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鹿茸是哺乳动物中唯一能够再生的组织器官,因此其为研究动物组织器官再生提供了独特模型。鹿茸生长中心细胞增殖生长速度是癌细胞的30多倍,并且没有发现任何癌变的迹象,了解其分子调控机制为研究癌症提供新的目标和方向。驯鹿是鹿科动物中唯一雌雄都长角的物种,但其雌雄鹿茸角的差异较大,脱角的时间不同,研究驯鹿茸雌雄差异表达基因更容易弄清楚鹿茸再生和生长发育分子调控机制。本试验采用鹿茸增殖、生长最快的顶端间充质组织为研究对象,Trizol法提取组织总RNA,利用mRNA差异显示PCR技术初步筛选驯鹿茸雌雄差异表达基因片段,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳、二次扩增、琼脂糖凝胶回收、产物克隆测序检测其假阳性,最后用实时荧光定量PCR鉴定结果。试验采用3条锚定引物(A、B、C)和10条随机引物(a、b、c、d、e、f、g、h、i、j、)共30对引物组合进行扩增,产物进行8%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,银染显色,共筛选获得52条差异片段,回收了7条,经测序BLAST序列比对,发现5条(Ae1、Af1、Af3、Ce1、Ci2)与已知基因序列高度同源,片段大小均在100-400bp之间。其中Ae1与牛的原肌球蛋白一4(TPM4)同源性较高(99%),原肌球蛋白参与调节肌肉收缩、细胞运动等生命活动,原肌球蛋白的表达量下调或与癌症发生有关;Aft与牛的SMAD5基因同源性较高(94%),SMAD5是与转化生长因子β (TGF-p)细胞信号转导有关的蛋白,有促进成骨的作用;Af3与牛的HMGB1基因同源性较高(98%),IIMGB1起到稳定细胞核,协助转录的作用,分泌到细胞外可能跟肿瘤的发生有关;Cel与藏羚羊的Ⅵ型胶原蛋白α3肽链(COL6A3)同源性较高(98%),Ⅵ型胶原蛋白是构成骨骼和肌肉的主要成分;Ci2与绵羊的SLC17A5基因同源性较高(92%), SLC17A5表达的唾液酸转运蛋白Sialin起到在细胞内转运游离唾液酸的作用。本试验初步发现:Ae1、Af3在雄性驯鹿茸顶端间充质层表达量大于雌性,Af1、Ce1、Ci2在雌性驯鹿茸顶端间充质层表达量大于雄性。实时荧光定量PCR鉴定COL6A3 (Ce1)在雌雄驯鹿鹿茸均表达且与1]RNA差异显示结果一致,但其差异表达不显著(P>0.05)。