糖皮质激素对肉仔鸡骨骼肌蛋白代谢的影响

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为探讨应激条件下肉仔鸡骨骼肌蛋白代谢的规律,本研究从肉仔鸡生长早期和生长后期两个阶段着手,用人为导入外源糖皮质激素的方法模拟应激,观察应激条件下蛋白合成途径和蛋白分解途径的数个关键基因mRNA相对表达量的变化情况,为骨骼肌蛋白代谢基因表达调控网络构建以及研究骨骼肌蛋白代谢的详细分子机制提供依据。试验一选取0日龄体重相近的Arbor Acres雄性肉鸡48只,随机分为三个处理:应激组(DEX)、对照组(NC)和采食量配对组(PF)。7日龄开始试验,应激组每天早8:00腹部皮下注射地塞米松,剂量为2.6mg/Kg体重,对照组注射与应激组相同体积的生理盐水,采食量配对组注射与应激组相同体积的生理盐水,同时饲喂应激组前一天的采食量。连续注射3天后,每个处理取8只鸡,10日龄8:00取样,取样前各处理均空腹12小时但不限制饮水。各试验鸡均心脏采血,分离血浆-20℃冷冻保存。同时取臀股二头肌(M . biceps femoris , BF)约2g,液氮速冻,-80℃贮存。取全部胸肌称重,测定胸肌指数(胸肌重/活体重),取左腿全部肌肉称重,测定腿肌指数(腿肌重/活体重)。每个处理剩余的8只鸡继续按照DEX、NC和PF各自的处理方法进行处理。连续应激7天后,14日龄时按照10日龄的方式再次取样。结果表明,本试验成功激发肉仔鸡应激,应激3天后采食量极显著提高,但日增重却极显著降低,导致料重比极显著升高,应激7天后体重极显著降低,料重比极显著升高,表明应激降低了肉仔鸡的生产性能,应激3天后胸腿肌指数显著上升,但胸肌绝对量无显著差异,腿肌绝对量降低,应激7天后胸腿肌指数变化不显著。血液生化指标方面,在应激3天和应激7天后都观察到了血浆尿酸、总氨基酸和胰岛素的含量不同情况的上升,应激3天后蛋白合成的相关基因mRNA相对表达量均极显著降低,蛋白分解途径相关基因的表达也受到抑制。应激3天后骨骼肌细胞膜上必需氨基酸转运载体的活性受到抑制,且胞外高浓度氨基酸无法逆转这一状况。外源糖皮质激素长时间处理下,骨骼肌蛋白合成代谢具有时间效应,即处理前期(3天)骨骼肌的增殖与分化受到抑制,处理的后期(7天)则骨骼肌的增殖与分化能力得以恢复。试验二选取0日龄体重相近的Arbor Acres雄性肉鸡48只,随机分为三个处理:应激组(DEX)、对照组(NC)和采食量配对组(PF),35日龄前自由采食自由饮水。35日龄8:00开始试验,应激组每天8:00和18:00两次腹部皮下注射地塞米松,剂量为1.3mg/Kg体重,自由采食和饮水,对照组注射与应激组相同体积的生理盐水,自由采食和饮水,采食量配对组注射与应激组相同体积的生理盐水,同时饲喂应激组前一天的采食量。连续注射3天后,38日龄8:00取样,取样前每个处理都下设空腹12小时和不禁食两个处理,每个处理8只鸡,自由饮水。各试验鸡均翅静脉采血,分离血浆,冷冻保存。同时取臀股二头肌(M . biceps femoris , BF)约2g,液氮速冻,-80℃贮存。取全部胸肌称重,测定胸肌指数(胸肌重/活体重),取右腿全部肌肉称重,测定腿肌指数(腿肌重/活体重)。结果显示,连续应激3天后体重出现负增长,但未观察到胸腿肌比例的变化。血浆中血糖、尿酸、胰岛素、IGF-I和总氨基酸在正常饲喂时都升高,出现高血糖高胰岛素并存的胰岛素耐受现象。而空腹12小时后,只有尿酸、胰岛素和总氨基酸含量上升。短时间禁食就能导致血浆IGF-I浓度的下降。应激条件下,促进蛋白合成基因的表达受禁食影响较大。
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