FSH在动物生殖过程中起重要作用，FSH药物制剂已广泛应用于提高家畜的繁殖力。目前FSH制品大多是从牲畜的垂体提取，混有LH且易造成病原感染。国内外学者已经克隆出多种动物的FSH基因，并在哺乳动物细胞表达系统中进行了体外表达，但表达量很低。采用哺乳动物的乳腺作为反应器，可有效提高外源目的基因的表达量。本研究就是在此基础上，构建以山羊FSH及其长效类似物乳腺暂态表达载体，通过乳腺暂态表达，检测载体构建的合理性和有效性，为一步研究转基因动物打下基础，促进转基因动物技术的应用和发展。 设计含相应酶切位点的特异性引物，以pVITRO-FSHβ-CTP-α为模板，通过两次PCR扩增反应分别获得含特异性酶切位点的FSHβ-CTP、FSHβ-CTP-α；将FSHβ-CTP、FSHβ-CTP-α和载体pcDNA经限制性内切酶酶切，再进行连接和转化，从而成功构建了乳腺暂态表达载体pcDNA-FSHβ-CTP以及pcDNA-FSHβ-CTP-α。通过酶切鉴定FSHβ-CTP、FSHβ-CTP-α序列正确。对载体pEGFP-N1进行双酶切，获得荧光蛋白基因EGFP作为报告基因，再将EGFP亚克隆至pcDNA，获得pcDNA-EGFP。将载体pcDNA-FSHα,β、pcDNA-FSHα,β-CTP、pcDNA-FSHβ-CTP-α以及pcDNA-EGFP采用两种不同的转染试剂转染至怀孕末期小鼠乳腺组织，小鼠分娩后12天内收集乳汁。放免检测乳汁当中FSH的表达量，以及表达持续的时间，同时制作乳腺组织细胞涂片，观察表达载体的转染效果。 综合比较采用不同的转染试剂、不同的转染途径所获得的乳腺暂态表达效果。结果表明脂质体的转染效果优于阳离子聚合物，单链长效pcDNA-FSHβ-CTP-α表达效果优于共转染的pcDNA-FSHα,β、pcDNA-FSHα,β-CTP，整个暂态表达周期中，在第6～9天出现峰值。 本次实验为优化乳腺表达系统提供参考，也为转基因动物的生产以及FSH制剂的人工合成奠定了分子基础。