康氏木霉的提取及发酵条件的筛选

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水稻秸秆资源丰富,但由于利用不当,造成大量浪费,引起环境污染。为了解决水稻秸秆主要组成成分难降解问题,本论文对微生物发酵稻草进行研究。目的在于通过对可再生资源的生物转化利用,拓展秸秆利用途径,在有利于生态平衡的条件下解决环境污染和资源浪费问题。本文对稻草秸秆微生物发酵进行了研究,包括菌种筛选、发酵条件筛选、体内试验。本研究首先筛选出分解纤维素能力强的菌种,为后续发酵稻草打下基础。样品取自延边大学农学院牧场内腐烂的稻草,经过羧甲基纤维素琼脂培养基、滤纸条培养基初筛,得到不同的具有分解纤维素能力的菌种,根据水解圈直径与菌落直径比值,筛选出高效分解纤维素菌,观察其群体形态、个体形态,并从生理生化特性方面对其进行鉴定。经鉴定为康氏木霉。对其最适生长pH、温度、天数进行测定,结果显示:所筛选康氏木霉生长最适pH为5.5,最适温度30℃,最佳生长天数6天。其次,以稻草和麸皮为主要原料,通过单因素试验优化康氏木霉固态发酵产纤维素酶的条件,对氮源、接种量、麸皮含量、含水量、发酵时间、发酵温度和初始pH值进行了研究。结果表明,最佳发酵培养基:氮源为(NH4)2SO4,接种量为7%,麸皮含量为40%,含水量为200%,初始pH值为5.0;最佳发酵条件:培养时间为96h,温度为30℃。再次,利用康氏木霉与酵母混合发酵处理稻草秸秆,证实酵母菌和康氏木霉之间不仅无拮抗,且酵母菌能促进康氏木霉的生长;单因素试验确定混合发酵最适发酵时间3天,最适发酵温度为30℃,,最适pH为4.5;正交试验得出酵母最佳添加量为70%,酵母在第3天加入,尿素添加量为1%。发酵料蛋白含量可达11.21%,还原糖含量20.65%。最后,选用3头安装永久性瘤胃瘘管的延边黄牛,利用尼龙袋法分别对碱化、发酵、普通稻草的中性洗涤纤维(NDF)、酸性洗涤纤维(ADF)、纤维素降解率(CEL)、半纤维素降解率(HC)进行瘤胃降解测定,试验采用3×3拉丁方设计。结果表明:随着时间的延长,中性洗涤纤维降解率、酸性洗涤纤维降解率、纤维素、半纤维素降解率增大。发酵稻草与碱化稻草几乎不存在差异显著性,而它们与普通稻草存在差异显著性(P<0.05)。
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