论文部分内容阅读
目的：观察应用干扰素α治疗的慢性乙型肝炎患者在治疗前、治疗中和治疗后不同免疫应答状态下浆细胞样树突状细胞的数量、功能变化及其分子机制，阐明与之相关的免疫学及抗病毒活性的机理，为更好的应用干扰素治疗慢性乙型肝炎以及更好的抗病毒方案的制定提供免疫学依据。方法：选择应用长效/短效干扰素α治疗的慢性乙型肝炎患者，HBsAg持续阳性6个月以上，HBeAg阳性，HBV-DNA≥105copies/mL，血清转氨酶（ALT）升高2-10倍，排除其它病毒性肝炎及肝脏疾病的慢性乙型肝炎患者作为研究对象；流式细胞仪检测患者治疗前、治疗4w、治疗12w、治疗24w四个时间点的外周血中浆细胞样DC数量及相关分子标志变化情况；结合患者上述各时间点的相关临床生化及病毒学等检测指标，对干扰素治疗疗效做相关分析。结果：慢性乙型肝炎患者经干扰素α治疗24w时，病毒学应答率为70%（21/30），ALT复常率为30%（9/30）,HBeAg血清学转换率20%（6/30）；慢性乙型肝炎患者DC及pDC细胞频数均高于健康对照组；DC及pDC上协同刺激分子CD40、CD80、CD86的表达明显高于健康对照组，差异具有统计学意义；经干扰素α治疗后，pDC细胞协同刺激分子CD40、CD80、CD86的表达较治疗前总体呈上升趋势，在4周时最高，与基线相比差异有统计学意义（p值分别为p=0.041,p<0.01,p<0.01）;4周后开始出现下降趋势，但仍高于治疗前水平；慢性乙型肝炎患者DCs细胞上PD-L1的表达明显高于健康对照组(P<0.05），应用干扰素α治疗后4周、12周、24周时与基线相比，PD-L1的表达明显上升（P<0.05，P<0.01，P<0.05）；病毒学完全应答和病毒学无应答组相比，治疗前及治疗各时间点pDC频数和协同刺激分子的表达均无明显差异；慢性乙型肝炎患者淋巴细胞亚群中CD8+T细胞数量与健康人相比明显下降（p<0.05）；CD4+T细胞和CD8+T细胞上PD-1的表达明显高于健康对照组（P<0.05），干扰素α治疗后PD-1的表达无明显变化。结论：慢性乙型肝炎患者外周血DC及pDC细胞频数高于健康对照组，pDC上协同刺激分子CD40、CD80、CD86的表达也高于健康对照组，提示pDC在慢性乙型肝炎患者并不是处于完全未活化状态，可能处于部分激活状态；干扰素治疗可促进DC和pDC频数的增多及pDC上协同刺激分子CD40、CD80、CD86的表达，提示干扰素治疗慢性乙型肝炎过程中可能会通过增加pDC细胞数量及其协调刺激分子的表达来增强免疫应答，以促进病毒清除；DCs细胞上PD-L1的表达及其受体PD-1在T细胞上的表达均较健康对照组明显升高，干扰素治疗24周时前者继续上升后者无明显变化，负性调节分子PD-1/PD-L1信号传导途径可能抑制了T细胞分泌细胞因子及其发挥细胞毒性作用，从而诱导了慢性乙型肝炎患者免疫耐受的形成。PD-1/PD-L1可能作为新的分子靶点，为HBV治疗提供新的思路和方法。