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目的探讨采用未成熟卵母细胞体外成熟技术(in vitro maturation,IVM)联合玻璃化冷冻保存黄体期卵母细胞并观察其复苏、受精后的发育能力,以保存某些女性肿瘤患者的生育能力。方法采用于2010年5月至2011年5月期间山东大学齐鲁医院妇产科手术待切除的卵巢组织表面穿刺获取的256颗未成熟卵母细胞,按月经周期分为卵泡期组(n=143颗)与黄体期组(n=113颗),各组间又分为新鲜对照组及玻璃化冷冻组。其中新鲜对照组,体外培养成熟后行卵胞浆内单精子显微注射受精(intra cytoplasmic sperm injection,ICSI),玻璃化冷冻组OCCs经体外培养至MII期进行玻璃化冷冻保存,解冻后行ICSI。IVM培养液配制成份：TCM199(M199,Sigma, USA)+75mIU/ml FSH(rFSH,Gonal-F,Serono)+2IU/ml HCG(丽珠医药,中国广东)+0.2ug/ml17-β雌二醇(E8004,Sigma,USA)+10%HFF+10%SSS(Irvine Scientific,USA)；冷冻载体为cryotop。分别比较各组间未成熟卵母细胞的体外成熟率、受精率、卵裂率、优质胚胎率及冷冻组的复苏存活率,同时记录、统计未成熟卵母细胞的体外成熟时间。结果1.卵泡期与黄体期未成熟卵母细胞的体外成熟率差异无统计学意义；两组间的复苏存活率68.0%VS48.1%,有统计学差异(P<0.05)；两组的新鲜组间受精率、卵裂率、优质胚胎率无明显统计学差异,冷冻组间差异亦无统计学意义。2.与新鲜组相比,玻璃化冷冻使两组卵母细胞的受精率、卵裂率均降低,有显著性统计学差异。3.本研究采用自然周期,体外成熟时间主要在24-72h之间,最长可达120h,其中24h、48h、72h成熟的卵母细胞分别占25.4%(65/256)、52.7%(135/256)、19.5%(50/256)。结论1.黄体期未成熟卵母细胞能够体外培养成熟,可以耐受玻璃化冷冻,并有继续发育为优质胚胎的能力；2.玻璃化冷冻使体外成熟的卵母细胞受精率、卵裂率均下降。3.未成熟卵母细胞体外成熟和冻存是某些女性肿瘤患者保存生育能力的一种有临床应用前景的方式。