大田软海绵酸(Okadaic acid,OA)是腹泻性贝毒(Diarrhetic Shellfish Poison,DSP)的主要成分之一。它是由海洋中的甲藻和鳍藻产生的一种疏水性脂肪酸聚醚型化合物,它可以通过食物链在各营养级生物之间传递和累积,人们食用DSP污染的贝类后,主要会出现腹泻、恶心、呕吐等症状,同时研究还表明OA具有诱导癌变和促进凋亡双重效应。本研究主要通过制备抗OA的单克隆抗体,并且利用抗体研发ELISA检测方法,并制备胶体金检测试纸条,实现对OA毒素的快速检测。通过碳化二亚胺法制备了完全抗原OA-BSA和OA-OVA。以OA-BSA为免疫原,进行Balb/c小鼠的免疫,同时以OA-OVA为检测原,进行小鼠血清效价的检测及抗体的筛选。将高血清效价的小鼠脾细胞与SP2/0细胞进行融合,通过筛选得到了 3株阳性杂交瘤细胞株,分别命名为10E8,10D1和8G12,其中10E8具有最高的效价且亚型为IgG1。将10E8细胞进行扩大培养,通过小鼠体内诱生法产生腹水,将腹水用辛酸-硫酸铵法和Protein G进行纯化,获得较高纯度的IgG抗体。将抗体进行亲和力的测定,抗体的亲和力为2.66×109 L/mol。通过间接竞争ELISA法测定,抗体的IC50为1.225 ng/mL,最低的检测限为0.244 ng/mL。用柠檬酸三钠还原法制备胶体金,经制备的胶体金与纯化后的抗OA单克隆抗体进行标记,将标记后的胶体金进行纯化,并且喷涂于金标结合垫中,制备的完全抗原OA-OVA包被在NC膜的T线处,将羊抗鼠IgG抗体包被在NC膜的C线处,进行胶体金试纸条的组装。同时进行了试纸条的条件优化,选择GL0194作为实验使用的金标垫,Millipore135S作为实验使用的NC膜型号,金标抗体按照1:4作为金标稀释使用,浓度为0.3 mg/mL的完全抗原OA-OVA按照1:6稀释使用,10 mg/mL的羊抗鼠IgG按照1:120倍稀释使用。将组装好的试纸条进行OA标品的测定,其检测限为2.5 ng/mL,并且与其它海洋毒素没有明显的交叉反应,特异性良好。本研究制备的单克隆抗体,能够成功地用于ELISA法对OA毒素的检测,并且能够用于胶体金试纸条的制备,这对实现海产品中OA的快速检测具有重要意义。