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目的:针对树舌灵芝(Ganoderma applanatum)85%醇提物进行化学成分的分离,并研究所得到的化合物的抗炎及神经保护作用,为阐明树舌灵芝的传统功效提供理论基础。方法:利用多种色谱手段对G.applanatum的85%醇提物进行分离纯化,并结合理化性质和现代波谱学的手段鉴定化合物的结构。利用LPS诱导的BV-2小胶质细胞炎症模型,给予化合物1干预后测定细胞上清液中一氧化氮(NO)以及相关细胞因子的释放量,采用DCFH-DA法测定细胞内ROS含量,研究化合物1的体外抗炎活性。利用LPS诱导BV-2小胶质细胞后的细胞培养上清液作用于HT22小鼠海马神经元细胞,JC-1、TUNEL、Heochst 33258染色法检测凋亡细胞,ELISA测定细胞内MAP2水平,确证化合物1通过抑制小胶质细胞的炎症反应起到神经保护的作用。结果:从G.applanatum的85%醇提物中分离得到9个化合物,分别是:包括15β-羟基-7β,8β-环氧-4,4,14α-三甲基-3,12,20-三羰基-5α-氢-9(11),16(17)-二烯(15β-hydroxy-7β,8β-epoxy-4,4,14α-trimethyl-3,12,20-trioxo-5α-pregn-9(1 1),16(17)-diene,1)、15β,20β-二羟基-7β,8β-环氧-3,12,23-三羰基羊毛甾烷-9,16-二烯-26-甲酸甲酯(1 5β,20β-dihydroxy-7ββ,8β-epoxy-3,12,23-trioxolanosta-9,16-dien-26-oic acid methyl ester,2)、Ganoderenic acid E(3)、Applanone E(4)、Applanoic acid B(5)、Gibbosic acidA(6)、Lingzhiol(7)、过氧麦角甾醇(8)、麦角甾-7,22-二烯-3-酮(Ergosta-7,22-dien-3-one,9)。这 9 个化合物中,包括 6 个 C-7和C-8位形成环氧的高度氧化的新颖C24及C30骨架的羊毛甾烷型萜类化合物(其中3个为新化合物)、1个杂萜化合物(为首次从树舌灵芝中分离得到)及2个甾体化合物。化合物1的体外抗炎活性的结果发现:它能在不影响细胞生长的前提下有效抑制过度活化的BV-2细胞释放NO,IC50=8.95 ± 0.92μM,并且在2.5-10μM范围内呈浓度依赖性地抑制过度活化的BV-2 细胞释放炎症因子(IL-1 α、IL-6、TNF-α)、趋化因子(GM-CSF、MCP-1、MIP-2),而且能够降低BV-2细胞内的ROS水平。利用化合物1处理后的LPS诱导BV-2细胞的条件培养基作用于HT22细胞,发现能够升高HT22细胞下降的线粒体膜电位、减少凋亡细胞的产生以及改善细胞膜的通透性,增加细胞内MAP2的水平。结论:树舌灵芝中的萜类化合物结构具有显著的多样性及新颖性,其次生代谢产物明显区别于其他常见的灵芝属真菌。本课题从树舌灵芝中发现了一个活性三萜类化合物,它能够通过抑制小胶质细胞的过度活化而起到神经保护的作用。这一发现为今后寻找更多活性化合物提供依据,从而能够进一步阐明树舌灵芝神经保护功效与物质基础的联系。