岷山红三叶因含有丰富且具有多种药理作用的异黄酮类化合物而受到了研究人员的重视。然而,岷山红三叶现阶段开发利用尚不充分,主要用作牧草供牲畜食用。本研究对岷山红三叶总异黄酮提取物的毒性、抗骨质疏松作用进行了初步研究;建立了一种高灵敏测定岷山红三叶中4种异黄酮的毛细管电泳方法,为岷山红三叶的进一步开发利用奠定了一定基础。主要研究内容如下:（1）研究了岷山红三叶总异黄酮提取物的毒性。采取的毒性试验包括急性毒性试验、骨髓微核试验以及长期毒性试验。在急性毒性试验中,分别进行预试验和正式试验。在预试验中,将20只雌性昆明小鼠随机分成5个不同的剂量组。在正式试验中,将70只雌性昆明小鼠随机分成7组,包括6个不同的剂量组和1个对照组。试验期间观察并详细记录小鼠行为外观等变化;对死亡小鼠及时进行解剖,肉眼观察是否存在异常,并制做病理切片观察毒性作用的靶器官。试验周期为14天。试验结束后计算半数致死量(LD50)为0.548 g/m L（10960 mg/kg）,95%置信限为0.277-2.592 g/m L（5540-51840 mg/kg）。死亡小鼠解剖时肉眼观察发现胃部存在膨气现象,其余部位肉眼观察正常。病理切片观察发现小鼠心、肝、肺以及胃部均存在不同程度的损伤。在14天后,除2只小鼠肺部依旧存在炎症外,其余小鼠损伤均已恢复。这表明,岷山红三叶总异黄酮提取物在小鼠灌胃给药方式中存在一定毒性,需要小剂量使用。在骨髓微核试验中,重复给药后处死小鼠,取骨髓,进行吉姆萨染色并观察。结果表明,岷山红三叶总异黄酮提取物对小鼠不具有致突变性。在长期毒性试验中,将雌性SD大鼠随机分为对照组、给药组和恢复组,给药组和恢复组均包括高中低三个剂量。给药组试验周期为12周,恢复组试验周期为16周。试验期间每周称重,观察大鼠行为、外观、进食等方面的变化,并在实验结束后采集血样,进行血常规和血生化检测。检测结果为:血常规检测未发现异常,血生化检测发现给药组大鼠的谷丙转氨酶（Alanine Amiotransferase,ALT）和谷草转氨酶（Aspartate Aminotransferase,AST）偏高且呈剂量依赖性,碱性磷酸酶（Alkaline Phosphatase,ALP）偏低但是不呈剂量依赖性,停药一个月后发现异常指标均趋于正常。结果表明,岷山红三叶总异黄酮提取物对大鼠存在一定肝毒性,但是停药后会逐渐恢复正常。（2）研究了岷山红三叶总异黄酮提取物对小鼠去卵巢致骨质疏松的防治作用。将雌性昆明小鼠随机分为阴性对照组、模型组、阳性对照组、岷山红三叶总异黄酮提取物高、中、低剂量组。在适应性饲养一周后进行去卵巢手术,术后一周灌胃给药,连续给药12周,每周测一次体重。给药结束后进行骨密度测定,并采集血清检测骨钙素（Osteocalcin,OCN）、雌二醇（Estradiol,E2）、白细胞介素-6（Interleukin-6,IL-6）以及血清钙水平。解剖取下右股骨测定骨密度,右胫骨制作骨组织切片。结果表明,岷山红三叶总异黄酮提取物不影响小鼠体重增长和血清IL-6水平,但是会增加骨密度,降低小鼠血清钙水平,升高血清E2和OCN水平。最后通过骨组织切片进行了验证,结果表明岷山红三叶总异黄酮提取物能有效防治去卵巢小鼠骨质疏松,其中以低剂量组效果最佳。（3）建立了毛细管电泳-酸坝堆积（Capillary electrophoresis-acid barrage stacking,CE-ABS）高灵敏测定岷山红三叶中4种异黄酮的方法。测定的4种异黄酮分别是大豆素、染料木素、芒柄花素和鹰嘴豆芽素A。优化得到的分离条件为:背景电解质为25 m M硼砂和2 m Mβ-CD;外加分离电压为20 k V;检测波长为260 nm。进样与进酸的时间比为150 s:20 s;所用酸为250 m M乙酸。使用的样品溶剂是60%（v/v）乙腈。所建立的方法对这4种异黄酮的富集因子分别为24.5、32.0、29.2和33.7,检出限和定量限均低至ng/m L。最后,将CE-ABS成功应用于大鼠血浆和岷山红三叶总异黄酮提取物中4种异黄酮的测定,验证了该方法的适用性和可行性。为将来对以上4种异黄酮的药代动力学研究提供了一种可能的分析方法。