研究背景和目的集装箱(Container)作为一种特殊的装载容器,在提高装卸效率、缩短停泊时间、节约装卸费用、降低企业运输成本的同时,因其具有密闭、保湿、保温的特点,又存在着极大的公共卫生和环境卫生风险。这些风险主要有：第一,成为传播医学媒介生物的载体；第二,成为医学媒介生物生长、繁殖的场所；第三,成为非法隐匿转移污染物的工具；第四,成为致病微生物的污染源。此外,由于集装箱本身结构有一部分属于植物产品的范畴,随着长期运输使用和磨损,使其在结构和材质上具备了携带土壤、动植物残留物、植物危害性病、虫、杂草及其他有害生物等疫病疫情及有毒有害物质的条件。在我国,国家质量监督检验检疫总局03年颁布了《入出境集装箱及其货物消毒规程》和《入出境集装箱卫生检疫查验规程》,从而为入出境集装箱空箱消毒制定了一系列标准程序。但是这些标准里面的方法大部分还是依靠人工方式来进行相关的消毒工作。这种人工的处理模式主要包括：第一,熏蒸消毒,拖车司机需要把集装箱拖运到检验检疫闸口规定的消毒区域,工作人员手持药物并把其投入到集装箱箱内,然后关闭箱门开始熏蒸消毒。消毒完毕,工作人员需要打开箱门,检测箱内气体残留量是否达到允许浓度后方能作业；第二,喷洒消毒,拖车司机需要把集装箱拖运到检验检疫闸口规定的消毒区域,工作人员手持消毒喷洒设备,对集装箱的外表面和内表面进行消毒处理。传统人工模式对集装箱空箱进行消毒,虽然可以达到一定消毒效果,但是这种模式却存在其不足,主要表现在：第一,消毒处理过程中由于个人原因造成其用药不均匀、不彻底。消毒处理时,工作人员对集装箱空箱的卫生处理存在不重视、不认真对待的态度,忽视消毒处理有关操作规定,按照习惯做法进行消毒处理,导致其开展工作时,只是应付处理,马虎了事,不能够做到对集装箱空箱进行全面、彻底的消毒。第二,在人工消毒时,难以避免一些有害物质以及消毒剂对人体健康造成的不良影响。对集装箱空箱进行消毒时,工作人员往往需要与消毒剂、熏蒸药物、医学媒介生物、致病微生物和一些有毒化学物质等近距离接触,这样会对工作人员的身体健康造成不良影响。第三,消毒消耗时间长,效率低。一般的人工消毒,所需要的时间往往在10分钟左右,如果发现空箱里面存在有待检验检疫物,尤其是对于问题标箱,往往需要通过采样—上报—卫生防疫处理这一规范程序,而这程序所花费的时间则达到半个小时及以上,这样会大大降低检验检疫工作的效率。第四,增加港口企业的成本消耗。传统的人工消毒模式,港口企业往往需要雇佣一定数量的人员,并且在港区划出一个地方专门用于集装箱空箱的消毒区,而这样往往会增加港口企业日常经营的成本和资源消耗,不利于企业的发展。由于传统的人工方式存在不足,在个别有条件的海港口岸,开始启用了集装箱自动消毒和处理的设备。通过引进这些自动消毒处理设备,提高了工作效率和通关速度。但是,这些设备仍然有其不足地方,主要表现在：第一,设备的稳定性有待提高。第二,未达到完全自动化,仍然沿用人工模式。鉴于当前人工消毒模式和旧式的半自动化消毒设备存在的不足,经过长期的实践和探索,本课题组的研究人员研制了新一代的全自动化快速消毒设备。为进一步评估设备的实际工作效果,提高海港口岸闸口卫生处理的工作质量和效率,本研究拟初步评价设备的消毒效果,通过对集装箱空箱消毒的效果进行试验评价,评估设备的实际工作状况,为进一步优化、改良和完善提供科学依据。方法1.分别取冻干的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌的菌种保存管,在无菌操作下,用接种环把少量菌株挑取加入到装有10ml脑心浸液的试管中,轻微振荡后,置36℃±1℃恒温箱培养18h～24h。用接种环挑取第1代培养的菌悬液,划线接种于不同的分离培养基上,于36℃±1℃恒温箱培养18h～24h。用接种环挑取上述第2代培养物中的典型菌落,划线接种于营养琼脂平板上,于36℃±1℃恒温箱培养18h-24h,为第3代培养物。最后用接种环挑取上述第3代营养琼脂平板的新鲜培养物,加入到标准麦氏度比浊管,利用浊度计来测定其含菌浓度得到需要使用的菌悬液。在实验室的生物安全柜内进行消毒剂的中和剂鉴定试验和定量悬液杀菌试验。2.在大肠杆菌的菌悬液和白色念珠菌的菌悬液内分别加入无菌的牛血清白蛋白,按照1：1与3：1的比例混合,分别配成含50%和25%的牛血清的菌悬液。在复合季铵盐的浓度为50mg/L情况下,在预先设定的作用时间内进行定量悬液杀菌试验,计算杀灭对数值；在复合季铵盐的浓度为50mg/L情况下,用酸碱调节剂分别将消毒剂的pH值调节为4个试验组,在预先设定的作用时间内别进行定量悬液杀菌试验,计算杀灭对数值；利用恒温水浴锅调节温度在试验范围内。在复合季铵盐的浓度为50mg/L情况下,在设定的作用时间内分别进行定量悬液杀菌试验,计算杀灭对数值。3.借助空气微生物采样器,在海港口岸现场对集装箱空箱内部预先规划好的采样点上进行消毒前和消毒后的空气采样,计算空气中的含菌量和杀灭率,观察消毒设备对空箱内部的空气消毒效果。4.在海港口岸现场对集装箱空箱内外表面粘贴实验室制备的染菌载体,通过消毒前和消毒后的采样,计算杀灭对数值,观察消毒设备对空箱内外表染菌载体的消毒效果；在海港口岸现场对集装箱空箱内表面中的里面进行消毒前和消毒后的采样,计算空箱表面自然菌含菌量和杀灭率,观察消毒设备对空箱内表面中的里面自然菌的消毒效果。结果1.当复合季铵盐浓度为100mg/L时,消毒剂对细菌繁殖体大肠杆菌和金黄色葡萄球菌作用lmin,其平均杀灭对数值均≥5.00；对真菌繁殖体白色念珠菌作用5min,其平均杀灭对数值均>5.00。2.当复合季铵盐浓度为50mg/L时,消毒剂的杀菌效果随有机物浓度增加而减弱,随温度的升高而增强,随pH值上升而小幅度增强。3.消毒设备对集装箱空箱内部进行消毒,3次试验后的平均杀灭率分别为85.51%、88.98%和85.31%。4.在模拟现场试验中,消毒设备对集装箱空箱进行内外表面的喷雾消毒,对贴于集装箱空箱内外表面上126张染菌载体(大肠杆菌)的平均杀灭对数值为5.34。以杀灭对数值作为判断依据,按照杀灭对数值≥5为合格,≤5为不合格的判断标准,在贴于集装箱空箱内外表面上的126张染菌载体中,合格的有113张,不合格的有13张,总体合格率为89.68%；对贴于集装箱空箱内外表面上126张染菌载体(金黄色葡萄球菌)的平均杀灭对数值为5.23。以杀灭对数值作为判断依据,按照杀灭对数值≥5为合格,≤5为不合格的判断标准,在贴于集装箱空箱表面上的126张染菌载体中,合格的有112张,不合格的有14张,总体合格率为88.98%。在现场试验中,通过消毒设备对集装箱空箱进行内表面的喷雾消毒,对集装箱内表面中的里面共40个采样点的平均杀灭率为95.94%。按照杀灭率≥95%为合格,≤95%为不合格的判断标准,在40份表面采样样品中,合格的有29份,不合格的有11张,总体合格率为72.5%。结论1.海港口岸闸口快速消毒设备使用的消毒剂对细菌繁殖体和真菌繁殖体具有良好的杀灭效果,可以在口岸集装箱空箱日常消毒处理中使用。2.海港口岸闸口快速消毒设备使用的消毒剂的杀菌效果会受到有机物、温度和pH值的影响。在集装箱空箱日常消毒处理中,要根据实际情况调整消毒设备的相关使用条件和技术指标。3.海港口岸闸口快速消毒设备对集装箱空箱内部进行空气消毒,其具有良好的杀灭效果,但与相关规定比较仍存在差距,需要提高设备空气微生物方面的消毒效果。4.海港口岸闸口快速消毒设备对集装箱空箱进行内外表面的喷雾消毒,其中集装箱空箱内表面中的里面的效果比其他表面的差,设备需要针对影响设备雾化效果的因素对设备进行完善。