目的在重组腺相关病毒载体介导的色素上皮衍生因子(rAAV -CMV-PEDF)的干预下,观察视网膜毛细血管形态的变化,探讨其对糖尿病大鼠视网膜血管内皮生因子受体(VEGFRs,即Flt-1,Flk-1)水平变化的影响,进一步了解其抗新生血管的作用机制以及对糖尿病视网膜病变发展的影响。方法选取体重为200-250g的健康雄性Wistar大鼠60只,随机分为正常组,对照组和实验组,其中正常组和对照组各15只,实验组30只,再分别平均分为1月、3月、6月三个不同时段,将链脲佐菌素(STZ)按60mg/kg腹腔注射,诱导对照组和实验组大鼠为糖尿病大鼠,成模的实验组大鼠右眼内注射rAAV-CMV-PEDF,左眼内注射rAAV-CMV-GFP;按1月、3月、6月分别处死各组大鼠,采用视网膜铺片技术,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白(GFP)在实验组大鼠视网膜的表达,以表明rAAV的转染能力;采用免疫组化技术检测糖尿病大鼠视网膜Flt-1,Flk-1蛋白水平的变化;采用视网膜血管铺片技术观察糖尿病大鼠视网膜毛细血管形态的变化,并计数内皮细胞数(E)和周细胞数(P)及其二者比值(E/P)的变化。结果GFP蛋白在实验组大鼠视网膜rAAV-CMV-GFP眼1月时即呈阳性表达,分布于视网膜全层,3月和6月时表达明显增强,表明rAAV具有较强的转染能力,可以成功将外源性PEDF转入眼内,且在眼内持续表达。Flt-1在实验组和对照组3月和6月时表达均上升,但对照组差异具有显著性(P＜0.05),而实验组差别无显著性(P＞0.05)。Flk-1在实验组3月时表达下降,6月时明显下降,均具有统计学意义(P＜0.05),对照组Flk-1在3月时表达开始上升,6月明显上升,差异均具有显著性(P＜0.05)。视网膜血管铺片显示随着病程的延长,对照组大鼠视网膜微血管形态发生明显改变,而实验组大鼠微血管形态改变不明显;正常组和实验组周细胞数(P)及E/P比值无显著性差异(P＞0.05),而对照组和正常组比较,周细胞数(P)减少,E/P比值增加,在3月和6月时均存在显著性差异(P＜0.05)。对照组和实验组比较.在6月时周细胞数(P)减少,E/P比值增加,差异具有显著性(P＜0.05)。结论在rAAV-CMV-PEDF的干预下,糖尿病大鼠模型随着病程延长,视网膜Flk-1表达下降,而对Flt-1的表达无明显影响,周细胞减少不明显,推测PEDF可能是与Flk-1结合,抑制了VEGF与视网膜毛细血管内皮细胞的结合,进而阻止VEGF发挥其促进血管内皮细胞增殖的作用,有延缓DR进展的趋势。