橄榄油对不同高脂模型大鼠脂代谢和脂质过氧化水平影响的实验研究

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前言膳食营养与慢性病,尤其是心血管疾病(Cardiovascular disease, CVD)的发生发展密切相关。随着我国经济水平的提高和居民膳食结构的改变,CVD已成为危害人类健康的主要疾病。而血脂异常特别是高胆固醇血症是导致心血管疾病发生发展的主要危险因素,因此,预防和控制血脂异常和高胆固醇血症的发生发展对降低心血管疾病的发病率和改善其预后有着极为重要的意义。橄榄油富含单不饱和脂肪酸(Mono-unsaturated fatty acid, MUFA),此外橄榄油还含有多种维生素、人体必需的微量元素以及抗氧化物质。关于橄榄油的研究目前主要集中于降脂作用方面,多数研究认为其富含油酸,在降低TC、TG、LDL水平的同时,对HDL无影响或有升高作用,其机制是MUFA能够促进卵磷脂的合成,提高卵磷脂-胆固醇酰基转移酶(Lecithin-cholesterolacyltransferase,LCAT)的活性,从而促进胆固醇的转运及排泄。但是,也有新近研究表明,保持一定剂量持续摄入MUFA可能会导致人体内胆固醇油酸盐的聚集,而胆固醇油酸盐的聚集与动脉粥样硬化的发生密切相关。目前,关于橄榄油降脂作用的机制还不十分明确,多数研究采用的动物模型为高脂肪高胆固醇模型。本研究通过建立不同高脂大鼠模型(单纯高脂肪模型,高脂肪高胆固醇模型),并在设置基础对照组的同时,设置与橄榄油同等剂量的猪油对照组,从新的角度来探讨橄榄油对大鼠血脂及脂质过氧化水平的影响。材料与方法1、实验动物的分组和处理选择健康雄性Wistar大鼠45只,体重100-150g,由中国医科大学动物部提供。大鼠适应性喂养1w后,将其按体重随机分为5组(n=9):基础对照组、猪油Ⅰ组、猪油Ⅱ组、橄榄油Ⅰ组、橄榄油Ⅱ组。2、实验动物的饲喂及干预实验期间,各组大鼠自由摄食、饮水,各组饲料配方如下:基础对照组——100%基础饲料猪油Ⅰ组——93.26%基础饲料、6.74%猪油猪油Ⅱ组——91.97%基础饲料、6.78%猪油、1%胆固醇、0.25%胆盐橄榄油Ⅰ组——93.26%基础饲料、6.74%橄榄油橄榄油Ⅱ组——91.97%基础饲料、6.78%橄榄油、1%胆固醇、0.25%胆盐3、样品的采集和指标的测定实验期间,每日记录喂食量,每3d记录一次撒食量,每w称量1次体重,共干预饲喂8w。喂养8w后,于乙醚麻醉下,经腹主动脉取血,分离血清后测定大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、血清丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)和总抗氧化能力(T-AOC)等指标。将大鼠脱颈椎处死,分离肝脏并观察肝脏形态改变。将肝脏称重后取部分肝组织固定,制作病理切片,在光学显微镜下观察肝脏病理改变。分离肠系膜周围、双侧肾脏周围及附睾周围脂肪垫并分别称重。计算大鼠的肝指数,内脏周围脂肪与体重比值。4、数据的处理和分析实验结果用x±s表示,用SPSS13.0统计软件进行单因素方差分析,组间两两比较用LSD法,检验水准α=0.05。结果1、动物一般状况及体重变化实验期间,各组大鼠生长发育未见异常表现。各组大鼠体重增量以橄榄油Ⅱ组最高,与基础组、猪油Ⅰ组比较具有统计学意义(p<0.05)。2、各组大鼠肝指数和内脏脂肪与体重比值观察各组肝指数:橄榄油Ⅱ组最高,橄榄油Ⅰ组次之,两个橄榄油组不仅高于基础组,也高于同等剂量的猪油组(p<0.05)。内脏脂肪与体重比值显示,猪油Ⅱ组>猪油Ⅰ组,橄榄油Ⅰ组>橄榄油Ⅱ组;同等水平的橄榄油组与猪油组比较,橄榄油组的内脏脂肪与体重比值均高于猪油组,但只有橄榄油Ⅰ组与猪油Ⅰ组比较具有统计学意义(p<0.05)。3、各组大鼠肝脏大体及病理改变各高胆固醇模型组肝脏明显发黄有油腻感,边缘变钝,切面突出,呈现颗粒感。而橄榄油Ⅰ组肝脏的大体改变接近于各高胆固醇组。猪油Ⅰ组和基础组肝脏的大体改变无明显差异,颜色鲜红,边缘锐利,切面无颗粒感。病理切片显示,基础组大鼠肝细胞形态正常,胞浆中几乎没有脂肪空泡;猪油Ⅰ组和橄榄油Ⅱ组大鼠的肝脏中有大量肝细胞发生了脂肪变性;猪油Ⅱ组大鼠的肝脏中部分肝细胞明显肿胀,显示出水变性样改变;橄榄油Ⅰ组大鼠的肝脏中大量肝细胞明显肿胀,普遍发生了水变性。4、各组大鼠血脂水平各组大鼠血清TC水平以橄榄油Ⅱ组最高,橄榄油Ⅰ组次之,与其他各组比较均具有统计学意义(p<0.05);猪油Ⅰ组和Ⅱ组的TC水平,从测定值上看也明显高于基础组,但其间差异没有统计学意义(p>0.05)。LDL-C方面,显示出各橄榄油Ⅰ组最高,且各橄榄油组均高于基础组和同等剂量的猪油组(p<0.05)。HDL-C水平从趋势上看,橄榄油Ⅰ组、Ⅱ组及猪油Ⅱ组明显高于基础组和猪油Ⅰ组(p<0.05)。5、各组大鼠脂质过氧化水平各组大鼠的脂质过氧化水平:在GSH-Px上,橄榄油Ⅱ组、猪油Ⅱ组与基础组基本一致,无明显降低,其他两组则低于基础组但各组间差异未显示出统计学意义(p>0.05);在T-AOC水平上,橄榄油Ⅱ组最高且与基础组比较具有统计学意义(p<0.05);其余各组在数值均略高于基础组,但与之比较不具有统计学意义。在SOD水平上,橄榄油和猪油各组均是Ⅱ组>Ⅰ组>基础组的趋势,但组间两两比较不具有统计学意义。在血清MDA水平上,各组之间的差异均无统计学意义(p>0.05)。结论在本研究条件下,得出如下结论:1.橄榄油不能明显减少高脂模型大鼠体脂含量并引起了明显的肝脏损伤。2.橄榄油使不同高脂大鼠模型血清TC明显升高,并且没有显现出降低LDL-C的作用。3.橄榄油没有明显的抗脂质过氧化能力。
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