植物磷转运蛋白基因转化烟草的研究

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磷是植物生长过程中重要的营养元素,调控植物的整个代谢过程,而土壤中能供给植物吸收的有效磷甚少,满足不了植物的需求,成为阻碍植物生长发育的因素之一。磷元素在植物体内的流动是一个复杂的过程,它的吸收和转运主要由磷转运蛋白负责。在缺磷的环境中,植物会通过提高磷转运蛋白基因的表达量来促进植物根系及其共生菌根菌丝对磷的吸收及转运。克隆的番茄LePT1基因是pht1家族成员之一,编码高亲和力磷转运蛋白。将LePT1基因转入模式植物烟草中,研究转基因烟草在低磷营养条件下的适应能力,为通过转基因技术创建耐低磷作物新品系奠定基础。本实验将克隆的番茄磷酸转运蛋白基因LePT1插入pCAMBIA2300,构建成植物表达载体。采用农杆菌介导法转化烟草,获得转基因植株。对转基因烟草植株的PCR及RT-PCR分析表明,外源基因已整合进转基因植株中并得到表达,转化率为68%;烟草LePT1基因受低磷诱导表达,且在低磷诱导12h时表达量明显增加。同时,在烟草根部及叶片均有表达,其中根部的表达强于叶片。对T1代转基因植株生长特性的研究表明:在低磷环境中,野生型植株明显出现低磷症状,而转基因植株生长良好;植株磷的含量有显著差异(P<0.05),转基因烟草的磷含量是野生型植株的1.62倍,说明在磷饥饿时,转基因植物能比野生型植株更有效的富集环境中的磷。
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