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研究背景去整合素金属蛋白酶8(a disintegrin and metalloproteinase8,ADAM8),是金属蛋白酶家族(ADAM)的成员之一,近年来被认为和哮喘及过敏性疾病有密切关系。ADAM8首先在巨噬细胞上发现,随后的体外实验发现其在人B淋巴细胞、单核细胞、树突状细胞等重要免疫细胞上均有表达。TNF-a、LPS、INF-r、IL-4、IL-13等炎性介质和细胞因子能刺激细胞表达ADAM8增加。动物实验发现,ADAM8 mRNA在哮喘组气道表达较正常组显著升高,ADAM8主要表达于哮喘小鼠气道上皮细胞及支气管、血管周围浸润的炎症细胞。另外,也有研究发现哮喘患者的气道ADAM8的表达较正常对照组显著升高,且其表达量与哮喘病情严重程度密切相关。同样,对哮喘患者诱导痰的研究发现,患者痰中的ADAM8 mRNA表达也明显升高,其表达量与诱导痰嗜酸性粒细胞计数呈正相关关系,并与第一秒用力呼气容积(FEV1)呈负相关。此外,在嗜酸性粒细胞肺炎(EP)的研究中,急性嗜酸性粒细胞肺炎(AEP)患者支气管肺泡灌洗液(BALF)的ADAM8蛋白表达显著增高,并与BALF中IgE的低亲和力受体sCD23水平呈正相关。目前的研究已初步证实ADAM8参与哮喘等过敏性疾病的病理生理过程。2010年最新的动物实验发现,ADAM8基因缺失小鼠的气道炎症和气道高反应性较野生鼠明显减轻,因此作者认为ADAM8在哮喘发病中发挥重要的促炎性作用,ADAM8可作为哮喘治疗的靶点之一。但是ADAM8在哮喘中的作用及机制目前仍不清楚,关于哮喘患者血清中ADAM8的表达变化及其与哮喘严重程度的关系,国内外尚无相关研究报道。研究目的1、本实验运用酶联免疫吸附法,检测正常组和哮喘组外周血sADAM8、sCD23的表达水平,分析二者的相关性及其与血嗜酸性粒细胞的关系。2、检测哮喘不同病情组血清sADAM8的表达水平,分析其与患者肺功能等临床指标的相关性,为ADAM8作为一种哮喘诊断及病情分级的指标提供实验依据。研究方法1、ELISA法检测人外周血sADAM8、sCD23含量选取南方医院2009年3月到5月就诊的支气管哮喘病患者和正常对照两组人群。其中,哮喘病人15例,男性5例,女性10例；正常人15例,男性9例,女性6例；两组年龄、性别均无显著性差异。所以研究对象均已告知试验研究内容,并签署知情同意书。按试剂盒写明的操作步骤,配置好使用试剂,按顺序依次添加标准品,血清样品等到酶标板,终止显色后应用全自动酶标仪选取450nm测定光密度值,制作标准曲线并换算样品的浓度。2、血清sADAM8测定值与临床相关资料的分析选取2009年6月到11间南方医院就诊哮喘病患者47例,和正常对照组20例。所以受试者均于本院检验科行血常规五分类检测,并依次依据病情分组进行统计,与各自的ADAM8测定值进行比较。肺通气功能测定使用6200 AutoboxDL型体积描记仪,按规定校准后测定。试验记录第一秒用力呼气容积实测值／预测值百分比(FEV1%Pred)指标,比较不同组别间FEV1%Pred,并将肺功能指标和血清ADAM8浓度做相关性分析。3、统计学处理应用SPSS13.0统计软件,各组结果以Mean±SD表示。两样本均数的比较采用t检验；多组间比较采用单向方差分析(One-Way ANOVA);相关性分析采用Pearson相关分析。结果1、ELISA法检测外周血sADAM8和sCD23的含量1)正常对照外周血sADAM8浓度为(237.18±28.03)pg/ml;哮喘组为(391.20±46.32) pg/ml,二者比较有显著性差异(P<0.01)。2)正常组sCD23浓度是(1.01±0.24)U/ml,哮喘组(1.54±0.31)U/ml,两组sCD23浓度相比,差异有统计学意义(P<0.01)。3)哮喘组sADAM8和sCD23之间呈正相关关系(r=0.530,P<0.05)。4)哮喘组sADAM8和EOS之间呈正相关关系(r=0.676,P<0.01)2、哮喘组外周血sADAM8浓度与病情分级、临床指标间的关系1)正常组、哮喘轻度组和中重度组的sADAM8浓度分别为：(241.14±26.06)pg/ml, (332.23±31.41) pg/ml, (421.16±41.13) pg/ml,中重度组的浓度最高,正常组最低。2)哮喘轻、中重度组sADAM8浓度分别与正常组相比,差异有统计学意义(P均<0.01)。轻度哮喘组与中重度哮喘组sADAM8浓度相比,差异有统计学意义(P<0.01)。3)哮喘轻度组sADAM8与肺功能呈显著负相关(r=-0.764,P<0.01),中重度组sADAM8与肺功能亦呈显著负相关(r=-0.795,P<0.01)。结论：1、哮喘患者外周血sADAM8浓度显著升高,与血EOS数量、sCD23明显相关,提示ADAM8参与了哮喘的病理生理过程。2、哮喘患者外周血sADAM8浓度与病情严重程度密切相关,ADAM8可能参与气道重塑过程。3、外周血sADAM8浓度可作为哮喘辅助诊断及病情评估的指标。