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随着生物冶金技术的不断发展,浸矿中起主要作用的各浸矿菌成为了研究的重点。由于各菌株对亚铁离子、元素硫及其它金属离子的不同作用,混合菌株具有优势互补作用,因而混合浸矿成为当今研究的热点之一。氧化亚铁硫杆菌(Thiobacillus ferrooxidans,简称T.f)是浸矿的主导菌种,在一定的条件下,氧化硫硫杆菌(Thiobacillus thiooxidans,简称T.t)能增强T.f的浸矿作用。 本文对从矿山酸性水中分离得到的一株高活性的T.t菌进行初步的生理生化研究,之后对其进行耐受性驯化培养,以适应浸矿的需要。实验结果表明:该T.t菌株是一种革兰氏阴性菌,单质硫是其生长的主要能量来源,原始菌株可以耐受一定浓度的铜离子,经驯化培养数代后,该菌氧化活性及抗铜特性均明显提高,表现在其外膜蛋白上则为某些蛋白的表达量增加或减少。 通过对低品位原生硫化铜矿的摇瓶浸出实验可知:在pH值1.8;培养底物为:(NH4)2SO4 66mg、K2HPO4 35mg、MgSO4·7H2O 123mg、FeSO4·7H2O 2.95g、S 0.344g、蒸馏水1000ml;接种数量级为108的T.f和T.t菌;矿石粒径≤50μm;矿浆浓度为5%时,可以得到最佳的浸出率,此外,Ag+对浸出有一定的促进作用。通过对矿渣的X-衍射分析可知,在浸出中,T.f菌表现为直接作用,而T.t菌通过Fe3+介导的间接作用对矿石起作用,使其分解。 T.f的浸矿能力与它的呼吸能力直接相对应,因而对呼吸链机制的研究有助于我们从能量的角度,阐述该菌的浸矿机理。铁氧化系统呼吸链的最初电子受体为Cyc2,该蛋白的合成受到电子供体S、Fe2+等的调控。我们以本实验室分离纯化以及经过耐受驯化的BY3为目标菌株,提取其外膜蛋白,通过SDS-PAGE和Cyc2特异抗体Western blotting等方法鉴定不同培养条件下,各菌株Cyc2蛋白的表达。实验结果表明:各菌株中目的蛋白的分子量不同,经过驯化培养的菌株要小于未经驯化培养的菌株;Cyc2蛋白的表达量与各菌株对Fe2+氧化能力呈正相关;此外,T.f菌中铁氧化基因的表达还受到底物的调控,因而经矿样驯化后细菌中的Cyc2表达量明显低于其他菌株。