固态发酵法去除花生粕中的黄曲霉毒素B1

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我国每年花生榨油后可得到约300万吨的花生粕。花生粕的营养价值较高,但其易感染黄曲霉菌而产生黄曲霉毒素(其中黄曲霉毒素B1毒性最大),限制了花生粕的广泛应用。因此有必要寻找一种去除花生粕中黄曲霉毒素的可行性方法。微生物固态发酵法因其处理条件温和、不会破坏产品品质等优点,日益受到关注。本论文主要研究了微生物固态发酵法去除花生粕中黄曲霉毒素B1的工艺。本论文从花生土壤和发霉花生粕中筛选菌株,选出对黄曲霉毒素B1去除效果最好的一株菌,对其进行鉴定,并将其应用在染毒花生粕中优化固态发酵条件,最后比较发酵前后花生粕中营养成分含量的变化。首先从花生土壤和花生粕中筛菌。初筛得到7株菌能在以香豆素为唯一碳源的培养基中良好生长,分别命名为TRS-1,TRS-2,TRS-3,TRS-4,FMS-1,FMS-2和FMS-3。通过复筛选出TRS-3菌株去除毒素效果最佳,其细胞和发酵上清液对黄曲霉毒素B1的去除率分别达到48.26%和78.55%,均明显高于其它菌株。接着从形态、生理生化反应以及16S rDNA测序方面对TRS-3菌株进行鉴定。结合此菌株的形态特点、生理生化反应特征和16S rDNA测序结果,在细菌分类上TRS-3菌株被初步鉴定为巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)。其对黄曲霉毒素B1的去除作用,国内外尚未见报道,本文首次报道了该菌株的解毒功能。随后用巨大芽孢杆菌固态发酵染毒花生粕,通过单因素试验优化,确定发酵条件为料水比1:1、种子液培养时间12h、菌液接种量10%、发酵温度35℃、发酵时间60h;对主要的3个因素进行响应面优化,得优化条件为料水比为1:1.1、发酵温度35.90℃、发酵时间64.32h,黄曲霉毒素B1的去除率为69.34%。最后检测发酵前后花生粕中营养成分含量的变化,结果显示发酵后花生粕中粗蛋白含量增长10.79%,总氨基酸含量增长5.08%,总黄酮含量基本不变,总糖含量减少5.5%,灰分含量基本不变。
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