一株具有抑制野燕麦土壤真菌的分离及鉴定

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本研究对坎布拉采集的土样进行微生物的分离纯化,试验共分离得到25株菌株,对各菌株发酵滤液进行活性筛选,得到一株强抑草活性真菌菌株NO.6,其对野燕麦种子胚芽、胚根抑制率分别为91.20%,93.10%,采用形态学和分子生物学手段对菌株NO.6进行了菌种鉴定,并对其抑草活性组分进行了分离纯化,以期为新除草剂的开发提供新的材料,同时也为以高效、低毒、低残留的生物农药的开发提供了理论依据。研究取得了如下的结果:1.确定了菌株NO.6的分类地位。通过菌株NO.6的ITS rDNA序列测定,结果表明菌株NO.6与Beauveria属内各种的同源性均在99.0%以上,结合形态学特征,确定菌株NO.6为球孢白僵菌(Beauveria bassiana)。2.确定了菌株NO.6代谢产物中抑草物质的提取有机溶剂。用等体积石油醚、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取3次,经减压浓缩得到粗提物,结果表明,乙酸乙酯是最佳的提取有机溶剂,乙酸乙酯粗提物对野燕麦种子萌发的抑制活性最好,其对胚芽、胚根的抑制率分别达到97.09%、96.08%。3.将萃取得到的乙酸乙酯粗提物经硅胶柱层析、薄层层析分离纯化。结果表明,共得到16个馏分,其中馏分Fr4对野燕麦种子萌发具明显抑制效果,其对胚芽、胚根的抑制率分别达到96.90%、96.88%。4.对馏分Fr4进行HPLC分析。结果表明,在流动相48%甲醇、波长220 nm、流速3 mL·min-1条件下,得到了保留时间为66.868 min的抑草活性组分3,其对野燕麦胚芽、胚根的抑制率分别达到87.74%,93.17%。
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