肝细胞性肝癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)是世界范围内最常见的恶性肿瘤之一。由于肝癌早期症状隐匿,缺乏特异性,并且绝大多数乙肝病毒携带者未能进行常规的肝癌筛查,大多数患者就诊时均已到中晚期,因此大肝癌(直径≥5cm)和巨大肝癌(直径≥10cm)在我国大陆地区很常见。近年来,随着肝胆外科手术切除技术的提高和肝外科理论知识的积累、肝脏影像学技术的进步、肝脏围手术期管理理论和经验的丰富以及治疗观念上的更新,大肝癌及巨大肝癌的手术切除效果获得了大大的改善,但与小肝癌相比,大肝癌外科治疗的远期疗效仍有待提高,围手术期死亡率、术后并发症发生率仍有待进一步下降[6.7]。肝癌术后5年累计复发率高达35%-75%,仍为主要死亡原因。肝癌术后复发分为近期复发(术后≤2年)及远期复发(>2年)。一般认为,肝癌术后近期复发归咎于被切除肿瘤的残存肿瘤细胞,当这些残存肿瘤细胞发展到常规影像学检查技术可以发现的程度,要么由于复发病灶太大,要么已合并出现远处转移,致使积极的治疗常常无法施行或收效甚微。因此,肝癌术后早期发现这些残存的肿瘤细胞将有助于规划术后进一步的治疗策略。肿瘤细胞可以自发脱落或人为挤压导致脱落后进入全身循环成为肝内或远处转移灶。应用聚合酶链式反应(PCR)鉴定肿瘤特异性基因转录产物(mRNA/循环DNA)这种分子生物学方法,可以敏感地发现少许血样标本中存在的脱落肿瘤细胞(Isolated tumor cell, ITC)。越来越多的研究表明,ITC可以被看做足肿瘤术后预后的一个指标。α-甲胎球蛋白信使RNA (AFPmRNA)通常被认为是肝脏特异及肿瘤特异的标志物。临床研究表明,外周血AFPmRNA与肝细胞肝癌血源性播散有关,对接受手术治疗、无水酒精注射或肝动脉化疗栓塞的肝癌患者有预后价值。然而,据我们所知，目前尚无文献报告大肝癌切除术后外周血AFPmRNA的变化情况及其与肝癌术后预后的关系,因此我们进行本研究以探求大肝癌切除术后监测外周血AFPmRNA能否预测术后肝癌的复发及转移。肝癌肿瘤直径超过10cm表明肿瘤已处于进展期,形成子灶或侵犯血管的可能性大大增加,导致术后肝内复发／转移和肝外复发／转移的可能性亦大大增加。据报道巨大肝癌(直径≥10cm)术后第一年复发率高达35%-72%,高复发率导致此类患者预后差。因此,抑制复发,特别是早期复发,是改善巨大肝癌患者术后预后的关键因素之一。迄今为止,已有诸多研究报告肝癌术后辅助治疗可以减少复发。这些辅助治疗包括：经皮肝动脉化疗栓塞、化疗、非循环性环甲酸治疗、免疫治疗及干扰素治疗。干扰素治疗作为肝癌术后辅助治疗是近十几年来兴起的热点。干扰素是一类细胞因子,拥有一系列的生物学特性,既有抗肿瘤特性,如抗增殖及抗血管形成,也有抗病毒等特性。一些作者报告,α-干扰素可明显降低术后早期复发,但也有与之相矛盾的临床研究报告。此外,一些回顾性及样本量较少的前瞻性研究发现,α-干扰素可以提高患者总生存率,而与此相反的临床研究结果亦可见于文献。尚未见文献报道术后α-干扰素治疗足否影响巨大肝癌患者术后复发及生存。方法1.巢式逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测外周血AFPmRNA实验分为大肝癌(>10cm)于术切除组(n=178例)和对照组(n=60,其中20名健康志愿者及40名非肝癌住院病人)。分别于术前及术后两周从各实验对象抽取外周静脉血5m1,用巢式RT-PCR检测AFPmRNA:2.统计所有178例巨大肝癌病人临床病理资料,对这些病人进行追踪随访,及时发现复发灶并记录患者生存情况；3.用统计学方法进行分析,以确定AFPmRNA能否预测巨大肝癌患者早期复发；4.α-干扰素用于AFPmRNA(+)患者术后治疗；60例术后AFPmRNA(+)巨大肝癌(≥1Ocm)病人术后随机分为治疗组(n=30)和对照组(n=30)。自术后第5-6周开始,用α-干扰素对实验组病人进行肌肉注射,初始剂量为300万U/次,2次／周,持续2周,随后改为500万U/次,3次／周,持续18个月；5.用统计学方法进行分析,以确定α-干扰素是否影响巨大肝癌患者术后复发及总生存率。结果1.用巢式逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)可以检测到外周血肝癌特异性AFPMRNA:2.对照组术前及术后外周血AFPMRNA均为阴件：3.实验组术前44.9%(80/178)患者外周血AFPmRNA为阳性,术后38.8%(69/178)为阳性；4.37例术后外周血AFPmRNA(+)患者术后1、2、3年无瘤生存率分别为64.6%、33.9%、0%；92例术后外周血AFPmRNA(一)患者术后1、2、3年无瘤生存率分别为80.0%、62.1%、29.1%,二者比较有明显统计学差异(P=0.001)；5.统计学分析表明,外周血AFPmRNA是无瘤生存率的独立影响因子；6.α-干扰素治疗组1、2、3年无瘤生存率分别为50.0%、33.3%、28.3%,较对照组的35.3%、14.1%、0%高,但两组之间无统计学意义；7.α-干扰素治疗组1、2、3年总生存率分别为82.5%、71.2%、49.8%,对照组为53.3%、33.8%、22.6%,两组之间有显著性统计学差异；8.统计学分析表明α-干扰素是总生存率的独立预后因素；9.统计学分析表明肝硬化、肿瘤数目、血管侵犯均是巨大肝癌患者术后预后的独立影响因素。结论1.能在巨大肝癌病人术前及术后外周血中检测到AFPmRNA:2.巨大肝癌术后外周血AFPmRNA可以作为预测肝癌早期复发的指标之一；3.术后α-干扰素治疗可以提高1、2、3年无瘤生存率,但无显著统计学意义；4.术后α-干扰素可以显著提高1、2、3年总生存率；5.肝硬化、肿瘤数目、血管侵犯均是巨大肝癌术后预后的独立影响因素。