T-2毒素、黄曲霉毒素B1(AFB1)、呕吐毒素(DON)和赭曲霉毒素(OTA)是霉菌生长产生的有毒代谢产物,属对虾饲料中自然发生的常见真菌毒素,毒性强,不易清除,性质稳定,可引起对虾疾病的发生以及生产性能下降、品质降低等,给对虾产业发展带来极大危害,造成巨大经济损失的同时也具有潜在的食品安全风险,有效控制其危害是亟待解决的热点问题。因此,本研究根据生物转化的原理,从诱导剂着手,通过Ⅱ相关键解毒酶的诱导表达,使对虾体内毒素残留量降低,病理损伤减轻,以达到降低常见真菌毒素的危害控制的目标。总体研究思路是根据毒理学设计原理,采用剂量递增法进行试验设计,T-2、AFB1、DON和OTA四种真菌毒素的初始染毒剂量分别为4.8、1.2、6.0和1.78 mg/kg作为起始染毒剂量,每天染毒,4天为一周期,每期递增1.5倍,连续染毒20天,并设置空白对照。另设置单独诱导剂组,以槲皮素、芦丁和茶多酚为诱导剂,同样根据递增量原则,其中槲皮素的初始添加量为饲料量的0.2%,芦丁为0.3%,茶多酚为0.04%,添加到饲料中的量按照2倍量递增,进行20天试验。同时设置诱导剂和毒素共同作用组,来研究Ⅱ相关键解毒酶介导的对虾中常见真菌毒素危害控制效应。主要从以下几方面考察真菌毒素导致的危害,比较诱导前后的危害变化,进而探明诱导对虾中常见真菌毒素危害的内源酶控制性技术。首先,从对虾生理特性的角度(存活率、增重率和摄食率等)考察,结果发现:四种毒素(T-2、AFB1、DON和OTA)均能导致对虾存活率降低,增重率、特定增长率和摄食率下降。在本研究的染毒剂量下,AFB1染毒对虾组的存活率最低,增重率和特定增长率最慢,摄食率也最小。通过20天剂量递增染毒,T-2和DON毒素蓄积系数分别为4.26和3.76,属于中等蓄积;KAFB1为2.24,明显蓄积,且通过LC-MS/MS在T-2、AFB1、DON和OTA染毒对虾体内检测到毒素残留,表明T-2、AFB1、DON和OTA毒素在对虾体内不仅存在物质蓄积,还有功能蓄积。其次,从病理组织学角度考察,结果表明:饲喂对虾,从对虾的肌肉、肝胰腺和肠道组织显微结构可以看出,四种毒素染毒对虾,随着累积染毒剂量的加大,病理损伤越严重,具有剂量依赖性。主要表现在肌肉肌纤维受损、肌节分离、肌间隙变大甚至断裂,最严重时出现溶融现象;肝胰腺基底膜脱落,细胞结构紧密性被破坏,肝小体受损,细胞溶解和细胞核消失;肠道主要是上皮黏膜褶皱变少,随着染毒的进行肠道壁可见炎症,严重时肠管组织分离,结构疏松,肌层变薄,呈现溶解状态。第三,从Ⅱ相关键酶入手,通过真菌毒素和诱导剂分别单独对对虾体内关键Ⅱ相关键酶的活力进行测定测定,结果表明,四种真菌毒素主要抑制对虾体内SULT和AANAT酶活,T-2毒素抑制递增染毒对虾肌肉中GSTs酶活表达,但在低剂量下(0.5mg/kg)能够激活20天蓄积染毒对虾肌肉中的GSTs基因表达;相反诱导剂对SULT和AANAT酶活的诱导效应大于GSTs、UGT和MT酶。之后通过诱导剂和毒素共同作用,发现诱导剂能够诱导染毒对虾体内SULT和AANAT酶活升高。最后,采用统计学分析,通过对诱导剂和毒素共同作用对虾生长指标的测定,对比单独毒素作用对虾的生长指标,发现诱导剂能够减低毒素对对虾的生长危害,且能减少对虾体内毒素残留量,对染毒对虾的病理组织有一定的修复作用。不同诱导剂激活对虾不同部位的不同酶。结论,(1)四种毒素均能导致对虾存活率降低,增重率、特定增长率和摄食率下降,其中AFB1毒素的作用强度最大;四种毒素均能导致对虾肌肉、肝胰腺和肠道不同程度的受损,随着累积染毒剂量的增加,肌间隙越来越大,片状化逐渐加重,细胞核消失,到后期甚至出现溶融状态;肝胰腺肝小体结构受损,细胞溶解,细胞核消失;肠道壁可见炎症,严重时肠管组织分离。(2)对虾组织中存在毒素残留,其中在对虾肌肉、虾头和血液中含量最多,T-2和DON毒素对对虾的累积染毒蓄积为中等蓄积,AFB1为明显蓄积,而20天染毒试验结束时,OTA组对虾死亡未超过一半,蓄积作用不明显。(3)真菌毒素对对虾体内SULT和AANAT酶抑制作用最强,三种诱导剂能够诱导SULT和AANAT酶活,诱导剂和毒素共同作用对虾组织器官中毒素残留量降低,且SULT和AANAT为主要诱导对象,诱导剂对毒素引起的病理结构损害有一定的修复功能,能够降低毒素对对虾生长指标的危害,SULT是对虾体内主要毒素代谢酶。