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目的:甲状腺癌是人体头颈部最为常见恶性的肿瘤之一,近年来甲状腺癌发病率上升趋势明显,分化型甲状腺癌的发生率最高。甲状腺癌的发生发展是由多种因素、多种基因共同协同的多步骤生物学变化过程,其发病机制较为复杂,基因、环境和性激素等均会影响甲状腺癌发生。目前甲状腺癌已上升至女性恶性肿瘤第五位,生育期女性发病率约为男性患者的3~5倍,推测甲状腺癌的发生可能与激素水平有关,但甲状腺癌是否为雌激素依赖性尚未达成一致结论。近年来人表皮生长因子受体-2(Her-2/neu)在乳腺癌中的研究越来越受到国内、外学者的重视,过度表达的Her-2基因被认为是乳腺癌患者的重要危险因素,因此Her-2/neu在其他研究领域是否产生更多积极的作用也成为了研究热点。本实验采用荧光定量PCR(RT-QPCR)和蛋白印迹法(Western blot)对研究雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)和人类表皮生长因子2(Her-2)在分化型甲状腺癌中的表达情况进行探究,阐明ER、PR和Her-2与分化型甲状腺癌患者临床生物学行为的关系及三者之间的相互关系,为分化型甲状腺癌的预防诊断、治疗和预后提供新的理论依据。方法:选取河北医科大学第二医院甲状腺相关疾病患者手术送检甲状腺组织作为研究标本。其中甲状腺乳头状癌患者33例,甲状腺滤泡癌患者20例,甲状腺腺瘤患者24例,结节性甲状腺肿患者20例,10例瘤旁2cm以远正常甲状腺做为正常对照组织。所有甲状腺疾病患者术前均未接受化疗和放疗,所有的甲状腺切片选择及诊断都应有病理科专科医师复核确认。采用RT-QPCR和Western bolt方法检测甲状腺组织ER、PR、Her-2mRNA和蛋白表达。分别分析ER、PR、Her-2表达与甲状腺乳头状癌和甲状腺滤泡癌患者性别、年龄、淋巴结转移临床病理特征的关系,并进一步对三者之间的相关性进行研究。采用SPSS13.0统计软件包处理数据,计量资料间比较用t检验,组间比较采用单因素方差分析,相关性分析采用Pearson法,P<0.05为差异有统计学意义。结果:1甲状腺组织中ER、PR、Her-2表达情况RT-QPCR法和Western-bolt法结果显示:甲状腺乳头状癌和甲状腺滤泡癌中ER mRNA和蛋白表达明显高于正常甲状腺组织(P<0.05);甲状腺腺瘤和结节性甲状腺肿ER mRNA和蛋白表达与正常甲状腺组织比较无显著差异(P>0.05);甲状腺乳头状癌ER mRNA和蛋白表达与甲状腺滤泡癌中ER mRNA和蛋白表达水平无显著差异(P>0.05)。甲状腺乳头状癌和甲状腺滤泡癌中PR mRNA和蛋白表达明显高于正常甲状腺组织(P<0.05);甲状腺腺瘤和结节性甲状腺肿PR mRNA和蛋白表达与正常甲状腺组织比较无显著差异(P>0.05);甲状腺乳头状癌PR mRNA和蛋白表达与甲状腺滤泡癌中PR表达水平无显著差异(P>0.05)。甲状腺乳头状癌和甲状腺滤泡癌中Her-2 mRNA和蛋白表达明显高于正常甲状腺组织(P<0.05);甲状腺腺瘤和结节性甲状腺肿Her-2 mRNA和蛋白表达与正常甲状腺组织比较无显著差异(P>0.05);甲状腺乳头状癌Her-2 mRNA和蛋白表达和甲状腺滤泡癌中Her-2表达水平无显著差异(P>0.05)。2 ER、PR和Her-2表达与甲状腺乳头状癌临床生物学行为的关系RT-QPCR法和Western-bolt法结果均显示:在<45岁甲状腺乳头状癌中ER表达明显高于≥45岁甲状腺乳头状癌表达,其差异有统计学意义(P<0.05);在无淋巴结转移组中ER表达明显高于有淋巴结转移组,其差异有统计学意义(P<0.05);ER在甲状腺乳头状癌中的表达水平与患者性别无关(P>0.05)。在无淋巴结转移的甲状腺乳头状癌中PR表达明显高于有淋巴结转移的表达,其差异有统计学意义(P<0.05);PR在甲状腺乳头状癌中的表达水平与患者性别、年龄均无关(P>0.05)。在无淋巴结转移的甲状腺乳头状癌中Her-2表达明显低于有淋巴结转移的表达,其差异有统计学意义(P<0.05);Her-2在甲状腺乳头状癌中的表达水平与患者性别、年龄均无关(P>0.05)。3 ER、PR和Her-2表达与甲状腺滤泡癌临床生物学行为的关系RT-QPCR法和Western-bolt法结果均显示:在无淋巴结转移的甲状腺滤泡癌中ER表达明显高于有淋巴结转移组,其差异有统计学意义(P<0.05);ER在甲状腺滤泡癌中的表达水平与患者性别、年龄均无关(P>0.05)。在无淋巴结转移的甲状腺滤泡癌中PR表达明显高于有淋巴结转移的表达,其差异有统计学意义(P<0.05);PR在甲状腺滤泡癌中的表达水平与患者性别、年龄均无关(P>0.05)。在无淋巴结转移的甲状腺滤泡癌中Her-2表达明显低于有淋巴结转移的表达,其差异有统计学意义(P<0.05);Her-2在甲状腺滤泡癌中的表达水平与患者性别、年龄均无关(P>0.05)。4 ER、PR和Her-2基因三者的相关性经Pearson检验,RT-QPCR法和Western-bolt法二种方法结果均表明甲状腺乳头状癌中ER和PR呈正相关;ER和Her-2呈正相关;PR和Her-2呈正相关。甲状腺滤泡癌中ER和PR呈正相关;ER和Her-2呈正相关;PR和Her-2呈正相关。结论:1 ER、PR和Her-2在分化型甲状腺癌中表达水平明显上升。2 ER表达水平与甲状腺乳头状癌患者年龄、淋巴结转移密切相关,而与患者性别无关;PR、Her-2表达水平与甲状腺乳头状癌患者淋巴结转移密切相关,而与年龄、性别均无关。ER、PR、Her-2表达与甲状腺滤泡癌患者淋巴结转移密切相关,与患者年龄、性别均无关。3 ER、PR、Her-2在分化型甲状腺癌中的表达呈正相关,联合检测三者的表达对分化型甲状腺癌的诊断、治疗和预后有一定的意义。