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目的：随着对慢性肾脏病的深入研究，已发现肾小球脏层上皮细胞即足细胞的裂孔隔膜结构和功能与肾小球滤过屏障有关、足细胞和裂孔隔膜相关蛋白的变化与足细胞裂孔隔膜的形态、功能和蛋白尿的发生密切相关。因此，裂孔隔膜蛋白变化与肾脏疾病关系的研究一直为人们所关注。
密度蛋白(densin)和β-链蛋白(beta-catenin)是近年来发现的足细胞蛋白，被认为与肾小球足细胞和裂孔隔膜的形态与功能有关。密度蛋白作为O-唾液酸蛋白家族的跨膜蛋白，最早由老鼠的前脑突触后密度区提取，属于富含亮氨酸重复序列和PSD-95/DIg-A/ZO(PDZ)区所组成的LAP蛋白家族。β-链蛋白被认为是密度蛋白的伴侣蛋白，与密度蛋白的功能不可分割。密度蛋白和β-链蛋白分布于肾小球足细胞和足细胞连接部位，是肾小球足细胞裂孔膜的重要组成部分。密度蛋白与F-肌动蛋白关系密切，密度蛋白可能以不同的方式与足细胞细胞骨架连接，密度蛋白与β-链蛋白的相互作用提供了一种通过α-链蛋白(alpha-catenin)与细胞骨架的连接。已知α-链蛋白与β-链蛋白和F-肌动蛋白相互作用，并因此把链蛋白/钙粘蛋白复合物(catenin/cadherin complex)连到细胞骨架。密度蛋白可能与黏附连接蛋白β-链蛋白可能共同发挥作用把钙粘蛋白、链蛋白和nephrin复合物连接到肌动蛋白(actin)细胞骨架与信号转导通路。密度蛋白和β-链蛋白与足细胞病之一的原发性膜性肾病(IMN)的关系尚未探讨。本研究旨在利用免疫组化的方法了解密度蛋白(densin)和β-链蛋白(beta-catenin)在原发性膜性肾病患者肾小球内的表达变化及其与蛋白尿，血肌酐等指标的关系，探讨密度蛋白和β-链蛋白对IMN患者的影响。
方法：病例来源于2007年1月至2007年12月期间在河北医科大学第二医院肾内科病房诊治的31例原发性膜性肾病患者。对照者来自同期河北医科大学第二医院泌尿外科病房诊治5例已行一侧肿瘤肾切除后证实为良性肾脏肿瘤肾的患者。应用免疫组织化学技术(PV法)，分别检测25例Ⅰ期IMN患者(Ⅰ期IMN组)、5例Ⅱ期及1例Ⅲ期IMN患者(Ⅱ+Ⅲ期IMN组)和5例因肾肿瘤行一侧肿瘤肾切除后被证实为肾良性肿瘤的患者(对照组)肾小球内密度蛋白和β-链蛋白的表达变化并与各组受试者尿蛋白等指标水平进行直线相关性分析。一抗为兔抗人β-链蛋白多克隆抗体和鼠抗人密度蛋白多克隆抗体。
结果：1临床实验指标：31例特发性膜性肾病组患者，平均年龄(50.74±10.64)与正常对照组，平均年龄(55.60±10.12)比较，在年龄构成上无统计学差异(P>0.05)；正常对照组的的24小时尿蛋白定量、血肌酐分别为：(0.05±0.03g/24h)、(63.74±8.95μmol/L)；Ⅰ期IMN组、Ⅱ+Ⅲ期IMN组、Ⅰ-Ⅲ期IMN组24小时尿蛋白定量分别为：(4.51±2.23 g/24h)、(4.78±2.16g/24h)、(4.56±2.26 g/24h)；Ⅰ期IMN组、Ⅱ+Ⅲ期IMN组、Ⅰ-Ⅲ期IMN组血肌酐分别为：(72.02±11.87μmol/L)、(76.30±6.50μmol/L)、(72.85±11.08μmaol/L)。2 免疫组织化学结果：2.1 密度蛋白在对照组正常肾组织的肾小球足细胞和IMN患者肾小球足细胞均有表达。在IMN组、Ⅰ期IMN组、Ⅱ+Ⅲ期IMN组及对照组肾小球的密度蛋白表达的阳性面积率值分别为：(30.69±11.96)、(34.46±9.95)、(14.98±3.93)、(49.56±4.89)。密度蛋白在IMN组、Ⅰ期IMN组、Ⅱ+Ⅲ期IMN组肾小球内的表达均较对照组显著减弱(分别为P<0.01，P<0.05，P<0.001)；密度蛋白在Ⅱ+Ⅲ期IMN组肾小球内的表达较Ⅰ期IMN组显著减弱(P<0.001)。2.2 β-链蛋白在对照组正常肾组织的肾小球足细胞、内皮细胞、系膜细胞及肾小管上皮细胞和IMN患者肾小球足细胞、内皮细胞、系膜细胞及肾小管上皮细胞均表达。在IMN组、Ⅰ期IMN组、Ⅱ+Ⅲ期IMN组及对照组肾小球的密度蛋白表达的阳性面积率值分别为：(35.49±11.75)、(39.66±8.75)、(18.10±3.30)、(59.16±4.34)。β-链蛋白在IMN组、Ⅰ期IMN组、Ⅱ+Ⅲ期IMN组肾小球内的表达均较对照组显著减弱(P均<0.001)；β-链蛋白在Ⅱ+Ⅲ期IMN组肾小球内的表达较Ⅰ期IMN组显著减弱(P<0.001)。2.3 IMN组肾小球内密度蛋白的表达与β-链蛋白的表达呈正相关关系(r=0.718，P=0.001)。2.4 IMN组肾小球内密度蛋白的表达与24小时尿蛋白定量呈负相关关系(r=-0.581，P=0.001)，而与血白蛋白、血肌酐、血脂、免疫球蛋白及血尿酸无明显相关性。IMN组肾组织内β-链蛋白的表达与24小时尿蛋白定量呈负相关关系(r=-0.550，P=0.001)，与血白蛋白、血肌酐、免疫球蛋白IgG及血尿酸无明显相关性。2.5 IMN组24小时尿蛋白定量明显高于对照组(P<0.01)。
结论：1.肾小球内密度蛋白特异性地表达于足细胞。密度蛋白在IMN组的表达较正常对照组组显著减弱，且密度蛋白在IMN组肾组织内的表达与24小时尿蛋白定量呈负相关关系。随着密度蛋白的减少，蛋白尿增多，提示密度蛋白表达降低可能破坏了裂孔隔膜的正常结构，参与了蛋白尿的形成。2.β-链蛋白非特异性地表达于足细胞。β-链蛋白在IMN组的表达较正常对照组组显著减弱，且β-链蛋白在IMN组肾组织内的表达与24小时尿蛋白定量呈负相关关系。提示β-链蛋白的异常表达与IMN裂孔隔膜损伤及蛋白尿有关。