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酪蛋白糖巨肽(casein glycomacropeptide,缩写为CGMP)是蛋白酶酶解κ-酪蛋白得到的C末端亲水性糖肽。90%的CGMP中含有唾液酸。CGMP的分子质量约为9kDa,但随pH而变化,在酸性范围内如pH3.5,大约为10~30kDa,中性条件如pH7.0,大约为20~50kDa左右。这主要是由于在不同的pH下CGMP的聚合程度不同造成的。CGMP独特的氨基酸组成和含有丰富的唾液酸使其具有多种生理功能,如能抑制胃分泌物;能调节免疫系统反应;能抑制病原体包括病毒和细菌等黏附至细胞;能结合霍乱和埃希氏大肠杆菌的肠毒素;能促进双歧杆菌的生长。除此之外,酪蛋白糖巨肽不含任何芳香族氨基酸,故可用作苯丙酮尿患者膳食中的首选成分;它富含支链氨基酸(缬氨酸和异亮氨酸),而且蛋氨酸含量低,使其在控制肝病方面也有成效。由于CGMP具有这么多功能,它可以广泛地应用于保健食品及药品中。CGMP的开发不仅为医药和保健食品提供了一种功能因子,而且也增加乳的附加值,这样可以获得更大的社会效益和经济效益。目前制备CGMP的方法主要是从乳清中直接提取和酶解酪蛋白后提取。这些制备CGMP的方法由于乳清和酶解产物的复杂,使得分离纯化比较困难,要得到高纯度的CGMP成本高且不适合于工业化生产。本实验研究一种不仅能根据需要而制备不同纯度CGMP,而且还适合于工业化生产的制备方法。本实验用凝乳酶水解酪蛋白制备CGMP,并研究了酶解的条件,再用Superdex 75 10/300 GL凝胶柱层析和PES-200超滤膜超滤分离纯化CGMP,并研究了凝胶柱层析和超滤的条件,最后用凝胶柱层析测定了CGMP纯度和分子量。凝胶柱层析得到蛋白回收率分别为0.65%、0.52%和0.29%和糖基化程度分别为71.6μg/mg、99.1μg/mg和44.4μg/mg的三类CGMP,它们的总蛋白回收率为1.46%、平均糖基化程度为76μg/mg。超滤制备的CGMP的蛋白回收率为1.77%、糖基化程度为70.1μg/mg。超滤和凝胶柱层析联用得到了比较纯的CGMP,它们的总蛋白回收率为1.08%、平均糖基化程度为78.9μg/mg,并且还可以得到蛋白回收率分别为0.45%、0.36%和0.27%和糖基化程度分别为89.7μg/mg、99.5μg/mg和33.7μg/mg的三类CGMP,它们的分子量分别为43000Da、30000Da和25000Da。