论文部分内容阅读
目的:早发精神分裂症(early-onset schizophrenia,EOS)是指首次发病年龄≤18岁的精神分裂症(schizophrenia,SCZ),其发病可能与谷氨酸系统功能异常有关,而NMDA通路相关基因突变可能会导致谷氨酸系统功能异常,因此本研究探讨NMDA通路相关基因(DAOA:rs2391191;NOS1AP:rs348624,rs12742393,rs1415263;DISC1:rs1000731,rs821633;GSK3B:rs6438552)多态性与早发精神分裂症关联性,探讨基因-基因交互作用对SCZ发病机制的作用。对象与方法:1.运用Taqman基因分型技术对153对EOS核心家系(包括153例EOS和306例其生物学父母)进行基因分型,利用Haploview软件进行H-W平衡及等位基因关联分析。采用GMDR软件对NMDA通路相关基因(DAOA:rs2391191;NOS1AP:rs348624,rs12742393,rs1415263;DISC1:rs1000731,rs821633;GSK3B:rs6438552)进行基因-基因交互作用分析。2.为进一步对153对EOS核心家系阳性位点进行验证,采用Taqman基因分型技术对288例早发精神分裂症患者(简称早发组),491例非早发精神分裂症患者(简称非早发组)和872例正常对照进行等位基因和基因型检测,运用SHEsis plus软件进行H-W平衡及等位基因关联分析。运用Kaplan-Meier统计方法分析阳性位点与SCZ发病年龄的相关性。3.采用Taqman RT-PCR技术对50例首发未用药SCZ和50例正常对照进行外周血NOS1AP m RNA表达水平检测。运用ELISA技术对22例首发未用药SCZ和58例正常对照进行外周血NOS1AP蛋白表达水平检测。结果:1.153对EOS核心家系,先证者中男81例,女72例,首发年龄13.94±2.94岁,本研究样本量Power值>80%。NOS1AP rs12742393位点存在显著的传递不平衡(P=0.03)。基因-基因交互作用显示:NOS1AP(rs348624,rs1415263,rs12742393),DISC1(rs821633,rs1000731),DAOA(rs2391191)和GSK3B(rs6438552)存在显著基因-基因交互作用(P=0.00)。2.早发组,非早发组和正常对照组三组性别和年龄匹配(P>0.05),基因型频率分布均符合H-W平衡(P>0.05),研究样本量Power值>80%。早发组和正常对照组之间rs12742393(NOS1AP)的等位基因和基因型频率分布存在显著差异(χ2=8.22,df=1,P=0.00;χ2=8.66,df=2,P=0.01)。生存分析显示:rs12742393危险等位基因(C)的频率与SCZ首发年龄显著相关(P<0.05)。3.39例首发未用药的SCZ和40例健康对照患者性别和年龄匹配(P>0.05),两组外周血NOS1AP m RNA表达水平存在显著差异(P=0.00)。22例SCZ和58例正常对照组性别和年龄无统计学差异(P>0.05),两组外周血NOS1AP蛋白表达水平有显著差异(P=0.00)。结论:NOS1AP基因rs12742393位点与中国汉族EOS的发病有关,且NMDA通路相关基因NOS1AP,DISC1,DAOA,GSK3B基因之间存在显著的基因-基因交互作用。