米曲霉分生孢子核型研究及萌发物成分的初步分析

来源 :福建师范大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:Roy163
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本研究初步分析了米曲霉FS1125单核及多核分生孢子萌发物组分的差异,为下步探讨米曲霉核型变化的遗传调控背景打下基础。主要内容及结果如下:(1)确定米曲霉FS1125察氏培养基上的产孢周期及孢子萌发的培养方式。通过米曲霉FS1125在固体察氏培养基上的培养,确定9~10天为成熟孢子收获期。分别经固体平板和液体摇瓶培养,发现固体平板培养6.5h后孢子萌发率为84.8%;液体摇瓶培养4.5h后孢子萌发率达88.9%。确定了液体摇瓶培养4.5h作为米曲霉FS1125分生孢子萌发初期获取萌发物的时间。(2)进行了米曲霉FS1125分生孢子的核型及粒径分析。通过DAPI核染色,运用荧光显微技术对米曲霉FS1125分生孢子核进行核型及核粒径测量分析,发现米曲霉FS1125分生孢子中双核及以上的核型占主要比例,其中单核约占9.1%,双核约36.4%,其他多核约占54.5%;孢子粒径主要分布在3~9μm范围,91%集中在4~7μm。单核分生孢子至少有50%分布在3μm,且3μm粒径的只有单核分生孢子。由此确定了分离单核、多核分生孢子的膜过滤方法。(3)初步分析单核孢子和多核孢子的萌发物组分的差异。分别收集单核及多核分生孢子萌发物。萌发物浸提液经全波长扫描及UPLC紫外光谱吸收检测,发现单核跟多核分生孢子浸提液最大吸收峰没有明显差异。使用薄层层析比对分析,则发现二者分别在硫酸乙醇显色及碘显色条件下差异明显,多个位置出现不一样的斑点。
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