肝再生增强因子竞争抑制检测方法的建立及临床初步应用

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目的:肝再生增强因子(Augmenter of liver regeneration, ALR)是Hagiya等于1994年对肝刺激因子(Hepatic stimulatory substance,HSS)的研究中发现的一种非特异性、具有热稳定性、不同于肝细胞生长因子(Hepatocyte growth factor , HGF)的促肝细胞再生因子。为进一步了解血清中人肝再生增强因子( Human augmenter of liver regeneration,hALR)的含量,研究hALR与不同程度肝病,尤其是与乙型肝炎不同阶段的关系,依据经典免疫学理论,我们拟建立一种不同于以往双抗体夹心法或间接ELISA方法的、适用于检测hALR这种小分子蛋白质的可靠检测方法。本研究拟采用直接竞争的反应模式来建立hALR的血清检测方法。通过制备hALR的原核表达纯品,用辣根过氧化物酶(Horseradish peroxidase,HRP)及铕元素(Europium,Eu)标记,为竞争抑制检测方法的建立提供抗原;利用抗hALR的单克隆杂交瘤细胞株,制备并扩增小鼠抗hALR的单克隆抗体(Monoclonal antibody,McAb);进而建立血清hALR直接竞争的检测方法,了解不同肝病患者血清中hALR的含量及意义。方法:1.抗原及标记抗原的制备
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