论文部分内容阅读
目的:本实验通过体内微核、染色体畸变实验与体外鼠伤寒沙门氏菌回复突变实验(AMES实验)评价戊二醛/辛醇、环氧化合物、染料介导光氧化处理的牛颈静脉对机体的遗传毒性作用;通过热原实验与全身毒性实验评价以上三种方法处理的牛颈静脉对机体的一般毒性作用。 方法:将戊二醛/辛醇、环氧化合物、染料介导光氧化处理的牛颈静脉按照标准制作浸提液。 一.遗传毒性实验:(1).微核实验:将三种浸提液及阴性、阳性对照物注入小鼠腹腔。每隔24小时重复注射一次,共4次。末次注射后24小时取股骨骨髓细胞制作涂片,Giemsa染色,光镜下计数1000个嗜多染红细胞,观察含有微核的嗜多染红细胞数,以微核率表示。用SPSS12.0软件包对数据进行x~2检验分析。(2).染色体畸变实验:供试液注射与微核实验相同。第4次注射后20小时腹腔注射秋水仙素,4小时后取股骨骨髓经低渗、固定处理,细胞悬液制作涂片,Giemsa染色。光镜下观察100个分散良好的中期分裂相细胞,记录染色体结构异常和数目异常的细胞,计算其畸变细胞率。统计方法同前。(3).AMES实验:在顶层培养基中依次加入测试菌株新鲜增菌液,混匀后分别加入浸提液、生理盐水或阳性对照物,加与不加S—9活化系统各半,倾倒在底层培养基上,37℃培养48小时。计数每皿上长出回变菌落数。 二.全身毒性实验:(1).热原实验:新西兰大白兔测其平均正常体温后,耳缘静脉注入浸提液,每隔1小时测量其体温1次,共6次,取该兔体温的最大升高温度(℃),并计算3只家兔最大体温升高总和。(2).全身毒性实验:(a).急性毒性实验:实验小鼠由尾静脉注入供试液,观察注射后4,24,48和72h的毒性反应程度分级;(b).亚急性毒性实验:注射方法同急性毒性实验,隔日重复注射一次,第28日取血作血常规及生化检查,用SPSS12.0软件包对检测数据进行x~2检验分析;(c).慢性毒性实验:注射方法同急性毒性实验,第60日取血作血常规及生化检查,统计方法同前。 结果:一.遗传毒性实验:(1).微核实验:阴性对照组雄性、雌性小鼠的股骨骨髓细胞微核率分别为1‰与1.2‰,辛醇组为2.2‰与1‰,PC组为1.2‰与1.8‰,光氧化组为1.8‰与1.6‰,各组之间