目的:中国是胃癌发病大国,多数患者发现胃癌时已为中晚期,常伴有淋巴结或者远处转移,导致治疗效果不佳。因此,探明胃癌侵袭转移的分子机制具有重要的意义。KDM1A作为体内重要的组蛋白去甲基化酶,已经被发现在多种恶性肿瘤中表达升高,参与肿瘤的发生与发展,但其在胃癌中的作用机制尚未明确。我们前期研究发现KDM1A可以调控胃癌细胞的增殖,但KDM1A在胃癌侵袭转移过程中的作用机制尚未完全阐明。本研究将通过免疫组化检测KDM1A、EMT相关蛋白（E-cadherin、Vimentin）在胃癌及癌旁组织中的表达,明确其临床意义;通过体外细胞实验研究KDM1A的表达对胃癌细胞侵袭转移能力的影响;最后,通过Western blot、细胞免疫荧光等实验方法探讨KDM1A调控胃癌侵袭转移的机制。本研究以KDM1A通过EMT调控胃癌侵袭转移为研究方向,为揭示胃癌侵袭转移的机制奠定基础,同时为寻找胃癌靶点治疗提供实验研究依据及理论基础。方法:1.通过免疫组织化学染色的方法,检测胃癌及其癌旁组织中KDM1A与E-cadherin、Vimentin的表达水平,采用χ~2检验和Spearman相关分析的方法结合临床数据,分析蛋白间的相关性及其临床意义。2.采用分子克隆及慢病毒转染等方法,构建KDM1A过表达和敲弱的胃癌稳转细胞,通过划痕实验和transwell小室实验,观察胃癌细胞侵袭转移能力的变化。3.采用荧光鬼笔环肽染色检测不同胃癌转染细胞株中F-actin的表达情况,通过细胞免疫荧光、Western blot检测KDM1A与EMT相关蛋白的表达情况,深入探讨KDM1A调控胃癌侵袭转移的潜在机制。结果:1.KDM1A在胃癌组织中的高表达率为69.70%,在癌旁组织中的高表达率为52.53%,Vimentin在胃癌组织中的高表达率为16.16%,在癌旁组织中的高表达率为5.05%,KDM1A和Vimentin在胃癌组织中的表达与癌旁组织相比,明显高表达（P<0.05）;E-cadherin在胃癌组织中的高表达率为36.36%,在癌旁组织中的高表达率为71.72%,差异有统计学意义（P<0.05）;KDM1A、E-cadherin在胃癌患者中的表达与肿瘤的分化程度、TNM分期以及淋巴结是否转移有关（P<0.05）,Vimentin在胃癌患者中的表达与TNM分期有关（P<0.05）;KDM1A和E-cadherin在胃癌组织中的表达呈现负相关（rs=-0.278,P<0.05）,与Vimentin的表达则呈现正相关（rs=0.230,P<0.05）;2.KDM1A过表达后胃癌细胞的侵袭转移能力明显增强,反之KDM1A敲弱后可抑制胃癌细胞的侵袭转移。3.胃癌细胞在KDM1A过表达后,呈间质细胞形态,多为长梭形,细胞胞质周边有较多的F-actin染色沉着,能发现明显的细胞伪足,而KDM1A敲弱后,胃癌细胞多呈较平坦、多边形的形态,细胞中较少有F-actin聚集,未见明显的细胞伪足;细胞免疫荧光和Western blot结果显示,过表达KDM1A后,E-cadherin的表达较对照组减少,而N-cadherin和Vimentin的表达增加。反之,敲弱胃癌细胞KDM1A后,E-cadherin的表达较对照组增加,而N-cadherin和Vimentin的表达较对照组减少;Western blot结果显示,过表达KDM1A后,TGF-β1、Notch1、hes1、N-cadherin、Vimentin、Snail表达增加,而E-cadherin表达减少。反之敲弱KDM1A后,TGF-β1、Notch1、hes1、N-cadherin、Vimentin、Snail表达减少,而E-cadherin表达增加。结论:1.KDM1A在胃癌组织中呈高表达,其表达与肿瘤的分化程度、TNM分期及淋巴结是否转移相关;2.KDM1A可促进胃癌细胞侵袭转移;3.KDM1A可能通过TGF-β/Notch信号通路调控胃癌细胞的EMT促进胃癌细胞侵袭转移。