山楂叶中熊果酸提取分离与测定研究

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山楂叶中的活性成分主要有黄酮类化合物和三萜类化合物,三萜类以熊果酸为主,药理研究发现熊果酸具有镇静、抗炎、抗菌、抗糖尿病、抗溃疡、降低血糖等多种生物学效应,极有可能成为低毒高效的新型抗癌药物。 目前的研究主要侧重两个方面:一是熊果酸的药理学研究,二是针对中药中的熊果酸成分的提取研究;并且都已取得重要成果。本文的主要研究内容是:从一种价格低廉的原料(山楂叶)中分离纯化熊果酸,重点探索一条适于工业化生产的工艺路线。为充分利用我国山楂资源,提高山楂植物的经济效益和社会效益提供技术支持。 本论文的研究结果主要有以下几个部分: 1、建立了山楂叶中熊果酸的高效液相色谱分析检测方法,并测定了河北不同地区山楂叶中熊果酸含量。该法准确可靠。对流动相组成、酸度、流速等条件进行了研究优化。此外建立了熊果酸高效液相色谱容量因子与流动相pH和甲醇体积分数的预测数学模型。 2、以河北保定地区的山楂叶作为研究对象,对其进行了熊果酸提取工艺研究。在提取工艺中对提取各因素进行了单因素条件试验和正交试验,确立了最佳提取条件:乙醇体积分数95%、提取温度85℃、提取时间110min、液固比5:1、提取次数为3次。在该条件下,熊果酸提取率为93.47%。 3、利用熊果酸的物理化学性质,采用酸碱沉淀法富集熊果酸。对传统工艺进行改进,获得最佳工艺参数:碱化:pH=11.00,酸化:pH为4.50,样品中熊果酸含量达到36.84%,回收率为94%。 4、研究了从山楂叶中纯化熊果酸的柱层析工艺。静态吸附结果表明X-5、NKA和AB-8树脂的吸附率分别为91.32%,72.28%和41.19%;以90%乙醇为洗脱剂,X-5、NKA和AB-8树脂的洗脱率分别为83%,70%,87%。静态实验表明X-5树脂具有较好的吸附解吸性能。动态实验考察了在X-5树脂中,优化流速、上样液熊果酸浓度和上样体积,结果表明流速为3BV/h,上样液熊果酸浓度为O.304mg/mL,上样体积为3BV为最优上样条件。 动态洗脱中采用梯度洗脱方式,结果表明:在90%的乙醇洗脱下,熊果酸纯度达93.21%。对层析工艺制备的熊果酸进行结晶处理,所获得的熊果酸纯度为98.61%,与熊果酸标准品红外光谱相一致。 5、研究熊果酸在X-5树脂上吸附动力学和热力学特性。通过动力学研究表明:在T=298K,pH=6.36时,熊果酸在X-5树脂上最大吸附量为0.1016 mmoL/g。通过热力学研究获得不同温度下,熊果酸在X-5树脂上吸附等温吸附符合Langmuir方程和Freundlich方程,熊果酸在X-5树脂上吸附的热力学参数:吸附热焓变ΔH=58.7683kJ/moL表明X-5大孔树脂吸附熊果酸为吸热吸附过程;吉布斯自由能AG随温度升高向负方向增加,表明吸附为自发的吸附过程;熵变ΔS=0.2329 kJ/(moL·K)表明在.X-5大孔树脂吸附熊果酸过程中液固界面之间增加了随机性吸附,热力学参数表明熊果酸在X-5树脂上吸附属于白发的物理吸附过程。
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