【摘 要】
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本研究以狂犬病嵌合病毒HepFHA和狂犬病毒疫苗株HepFlury为研究对象,进行了病毒的鉴定和生物学特性的比较性研究。研究结果如下: 利用RT-PCR技术,从传至5代的嵌合病毒HepFHA
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本研究以狂犬病嵌合病毒HepFHA和狂犬病毒疫苗株HepFlury为研究对象,进行了病毒的鉴定和生物学特性的比较性研究。研究结果如下:
利用RT-PCR技术,从传至5代的嵌合病毒HepFHA的基因组中,成功扩增出狂犬病毒N基因的一段保守序列和插入的外源禽流感病毒HA基因;疫苗株HepFlury的基因组只能扩增出狂犬病毒N基因的保守序列。免疫荧光抗体试验检测结果显示,在BHK-21细胞中,传至5代的嵌合病毒HepFHA和疫苗株HepFlury均能稳定增殖。
细胞适应性试验表明,狂犬病毒HepFHA和HepFlury株连续5代,均能在BHK-21细胞中稳定增殖,4~6天病毒滴度达到高峰期。MDCK细胞中病毒的增殖效率低于BHK-21细胞,但嵌合病毒HepFHA对MDCK细胞的适应性高于疫苗株HepFlury。PK-15细胞、Marc-145细胞、Vero细胞上病毒不能稳定增殖。研究还显示,两株病毒在敏感细胞的增殖过程中,均不产生细胞病变、不形成蚀斑。血凝活性试验表明,这两株病毒对鹅红细胞无血球凝集现象。
本论文还研究了这两株病毒对小鼠的致病性和免疫原性。乳鼠颅内接种试验表明,同一水平攻毒剂量下,嵌合病毒HepFHA对乳鼠的致死率明显低于疫苗株HepFlury。小鼠颅内接种试验表明,这两株病毒均能在小鼠颅内稳定增殖,均影响小鼠体重的正常增长,病毒的攻毒剂量是重要影响因素之一。病毒滴度为6×10<3>FFU时,在6周龄小鼠体内能产生抗体,但嵌合病毒HepFHA抗体水平低于疫苗株HepFlury。
综合分析本研究的试验结果,可以得出嵌合病毒HepFHA的毒力较狂犬病毒}IepFlury株弱,但对小鼠的免疫效果低于疫苗株HepFlury,对其两毒株全面的生物学评价,仍有待进一步的深入研究。
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