中链脂肪酸甘油三酯作为免疫佐剂的免疫效果的研究和应用

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由于疫苗研制日益变得复杂,同样对佐剂也提出了更高的要求,佐剂在生产制造技术上的改进创新,如延缓抗原释放速度,能延长疫苗的免疫有效期,使疫苗(人用与兽用)更有效更安全,这是全球各大疫苗厂商进行研究和开发的重点领域。因此,探讨研究不但能够发挥其增强免疫作用的功效,又可使其具有运载抗原,促进抗原活性提高的佐剂对于新型佐剂的研究进展意义重大。本论文以寻找具有高效、速效、低毒、无不良反应的新型免疫佐剂为主要目标,以中链脂肪酸甘油三酯(MCT)作为佐剂进行初步研究为切入点,通过前期MCT对新城疫、传染性支气管炎和禽流感的抗体变化规律、T淋巴细胞增殖的变化、对淋巴细胞分泌细胞因子IL-2,IL-6,IFN-γ的影响、免疫器官的变化以及对鸡的生长性能的影响的探讨,并与常规白油佐剂进行比较。然后较为系统的研究了MCT作为佐剂制备的新城疫、传染性支气管炎和禽流感(ND-IB-AI)三联苗的安全性、毒理学和免疫效力等,最后初步研究了MCT中加入不同的免疫增效剂的免疫效果,具体研究内容包括以下几个方面:1、MCT作为佐剂对鸡新城疫、鸡传染性支气管炎、鸡禽流感的免疫效果的初步研究。为研究以MCT作为新型佐剂制备的新城疫、鸡传染性支气管炎和流感灭活疫苗在鸡体内的抗体效价以及对机体的免疫作用,拟免疫试验鸡后,分别采用微量血凝抑制法检测试验鸡免疫不同疫苗后机体的抗体效价,MTT法检测外周血T淋巴细胞的动态增殖变化,双抗夹心ELISA法检测对淋巴细胞分泌细胞因子IL-2,IL-6,IFN-γ的影响,并通过计算料肉比检测对鸡的生长性能的影响。2、MCT为佐剂制备的ND-IB-AI三联苗的安全性和毒理学研究。分别为三联苗对最小使用日龄靶动物、各种接种途径的一次单剂量接种的安全性试验;三联苗对靶动物非使用日龄的安全性试验;三联苗对靶动物单剂量接种、单剂量重复接种、一次超剂量接种的安全性试验以及三联苗对鸡的免疫学影响及对鸡的急性毒性试验。3、MCT作为佐剂制备的ND-IB-AI三联苗的免疫效力的研究。包括三联苗免疫期试验;三联苗不同免疫途径接种对鸡的效力试验研究;三联苗最小免疫剂量试验;三联苗血清学效力检验与靶动物免疫攻毒保护结果相关性研究;三联苗抗体消长规律的研究;三联苗免疫种鸡的子代母源抗体测定及攻毒保护试验。4、MCT作为佐剂分别加入鱼肝油萜和马尾藻多糖为增效剂的免疫作用的研究。试验拟分别用加入鱼肝油萜和马尾藻多糖的佐剂进行比较试验,对试验鸡分别免疫新城疫和流感(H5N1和H911)灭活疫苗后,分别采用微量血凝抑制法检测试验鸡免疫不同疫苗后机体的抗体效价,MTT法检测外周血T淋巴细胞的动态增殖变化,双抗夹心ELISA法检测对淋巴细胞分泌细胞因子IL-2,IL-6,IFN-γ的影响,并通过计算料肉比检测对鸡的生长性能的影响。本论文的研究将MCT乳液体系应用于疫苗的佐剂系统,实现了疫苗免疫力产生迅速,免疫效力持久的理想目的,同时也可以天然油脂代替疫苗中矿物油,降低疫苗的毒副作用,改善肉质,可实际应用于蛋鸡和肉鸡的养殖中,从而取得良好经济效益和社会效益。为MCT在动物佐剂方面的应用提供了一定的理论依据。
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