生物柴油,即脂肪酸甲酯,是以动植物油为原料生产的可再生绿色能源。目前生物柴油的工业化生产均采用化学法,这种方法存在醇必须大大过量、能耗高、产物难于回收和废碱液污染环境等缺点,并且对原料的要求高,导致生产成本过高。为此,酶法生产生物柴油在国内外受到广泛关注,酶法生产生物柴油具有反应条件温和、醇用量小、产物易分离和无污染排放等优点。目前国内酶法相关的研究主要集中在精制豆油方面,而对其它丰富的植物油尚未触及。因此,本文选取棉籽油、沙蒿油为原料对固定化脂肪酶(Candida Antarctica)催化制取生物柴油的酯交换反应条件进行了较为系统的研究,具体工作如下:(1)首次以沙蒿多糖-壳聚糖复合磁性微球为载体,采用物理吸附法固定化脂肪酶,对固定化过程中对酶活力有影响的各种因素做了研究,对固定化酶做了部分表征,以及对固定化酶的部分理化性质最佳PH,最佳温度,酶的热稳定性以及表观米氏常数与游离酶的做了比较,固定化酶的Km小于游离酶的Km,固定化酶的最佳PH和最佳温度分别为8.0和50℃,而且固定化脂肪酶具有良好的热稳定性,可重复使用。(2)对固定化脂肪酶催化棉籽油和沙蒿油制备生物柴油进行了条件实验。通过条件实验,得出:反应时间36h,反应温度在45℃时,生物柴油转化率达到最高;当固定化酶浓度为5mg/25ml,生物柴油转化率已达峰值;当反应体系的醇油比为3:1时,生物柴油转化率达到最大,反应12h分别达到53.0%和29.1%,增加或减小醇油比转化率均下降;两种原料均不适合加入水分;正己烷、石油醚、乙醚三种不同有机溶剂中,正己烷可显著提高酶的活性,而体系不加有机溶剂时,酶几乎失去催化活性;在醇油比为3:1,甲醇投加总量一致的情况下,甲醇一次性加入时反应转化率较低,当总反应时间为24h时,甲醇分3次投加,转化率可达到最大85.9%和74.3%,如果再增加醇投加次数,反应转化率无明显变化;摇床转速达到200rpm-250rpm时,转化率达到最高值。最终通过试验确定了最佳方案为:油酯/甲醇=1:3 (mol:mol) ,分三次等摩尔加入,酶溶液浓度5/25(mg/ml),以正己烷为溶剂,加入一定量的变色硅胶,反应时间为36h,温度45℃,转速200rmp-250rmp,棉籽油的转化率达到92.1%,沙蒿油的转化率达到75.8%。