目的(1)以绵羊自然发病肝包虫病例为研究对象,对该病例进行病理形态学观察及分期。为临床治疗和防治肝包虫病提供理论参考依据。(2)探讨囊型肝包虫囊周肝组织与正常肝组织的差异表达基因。(3)用蛋白质组学方法,建立人肝包虫囊周肝组织及正常肝组织的二维电泳图谱,筛选囊周肝组织与正常肝组织间差异表达蛋白,期望得到肝包虫发生发展相关蛋白。方法(1)采用石蜡包埋、切片、HE染色法对40例自然发病肝包虫绵羊进行镜检,分析结果。(2)取囊型肝包虫病人囊周肝组织与正常肝组织,应用抑制差减杂交技术构建正、反向差减杂交文库。经酶切鉴定存在表达差异的阳性克隆送去测序,测序结果Sequence Scanner V1.O去除酶切位点,再经Blaxtn和Genbank公共数据库进行比对。(3)收集术后新鲜肝包虫囊周肝组织和距包囊5厘米以上正常肝组织保存于液氮中备用。提取组织总蛋白,采用双向凝胶电泳(2-DE)技术得到各组凝胶图谱。结果和结论(1)根据绵羊肝包虫病理发生、发展及转归不同,可将肝包虫的病理改变过程分为两种类型。其一:肝窦扩张期、炎细胞渗出期、肉芽肿形成期、汇管区周围纤维组织增生期、囊肿形成期。其二:肝窦扩张期、炎细胞渗出期、肉芽肿形成期、坏死期、脓肿灶形成期,脓肿液被吸收、消散、形成钙化灶。并依其疾病的发展程度,将肝窦扩张期、炎细胞渗出期归为轻度,肉芽肿期、汇管区周围纤维组织增生期归为中度,囊肿形成期归为重度。(2)共筛选出阳性克隆306个,其中正向差减文库阳性克隆292个,反向差减文库阳性克隆14个。送去的测序的127条序列中,有92条测序成功,除去重复序列,共获的71条差异序列。(3)建立了囊周肝组织和正常肝组织双向凝胶电泳图谱,多数蛋白质点集中在pH4-7之间。摸索建立了肝组织蛋白样品的制备方法,并初步优化了蛋白质组学研究中的实验条件。