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以植物乳杆菌299为研究菌株,为了提高植物乳杆菌299的最终活菌数,为其将来的商业化生产提供参考,分别对发酵培养基、高密度发酵工艺、真空冷冻干燥的冻干工艺和保护剂浓度以及菌粉包装及储藏期进行了研究,并得到了以下结论：(1)通过单因素、PB和响应面试验分析,以MRS培养基为基础,优化得到植物乳杆菌299的最佳培养基为：蛋白胨2.33%,酵母膏1.41%,葡萄糖2.52%,柠檬酸氢二胺0.40%,乙酸钠0.30%,磷酸氢二钾0.80%,Tween-800.30%,硫酸锰0.0025%。培养得到的菌体OD600可达到1.2687,比相同条件下在MRS培养基中菌体OD600提高了28.9%,同时,优化后的培养基去掉了牛肉膏和硫酸镁两种成分,简化了培养基配方。(2)在确定最适培养基以及前期实验室工作的基础上,在30L半自动发酵罐上对影响高密度发酵工艺的因素进行优化,得到最佳高密度发酵工艺为：发酵恒定pH值为5.5,中和剂为25%的氨水,搅拌转速为1 OOr/min,菌体生长限制性底物为碳源和氮源,补料液碳源和氮源最佳比例为3：2,同时在对数期末期对发酵体系进行相隔4h的两次补料。在此条件下,植物乳杆菌299经过高密度发酵培养24h后,发酵液的菌体OD600可达到1.3422,较普通发酵培养提高约44%。(3)对影响真空冷冻干燥的条件及保护剂配方进行优化。得到该菌株的最佳冻干工艺为：预冻温度为-80℃,预冻时间为2h,菌泥与保护剂的最佳比例为2：5,最佳冻干厚度为1.2cm,脱脂乳浓度为16%,冻干时间为20h。经过优化后,最终获得的菌粉中植物乳杆菌299的活菌数达到2.11×1011cfu/g,冻干存活率为89.8%。(4)对植物乳杆菌299的菌粉包装及储藏条件进行了研究。发现在-20℃保藏1年时间内,用铝箔袋和PET-PE袋(普通真空包装袋)进行包装时,两者无显著性差异,菌活仍可维持在1011cfu/g;在4℃及25℃下保藏时,铝箔袋对菌体的保护效果较PET-PE袋效果好,并且温度越高,差异性越大;用铝箔袋进行充气包装时,发现混合气体为95%N2-5%CO2时菌体存活率最高。