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乙醛脱氢酶通过参与生物体内乙醛的代谢过程,从而减轻乙醛对细胞的毒害作用。目前,尚未见有关糙皮侧耳乙醛脱氢酶基因的报道。本研究首次对糙皮侧耳的乙醛脱氢酶基因poaldh1进行了克隆和功能分析,旨在从抗逆境胁迫的角度来揭示糙皮侧耳原基形成的机理。本实验室前期通过对糙皮侧耳双核菌丝期和原基期进行基因差异表达分析,获得了一个可能编码乙醛脱氢酶的基因,并将其命名为poaldh1。首先,本文通过将前期获得的poaldh1基因的EST标签与糙皮侧耳PC15菌株的转录本进行比对分析,获得了poaldh1基因的编码区序列。然后通过反转录PCR（RT-PCR）方法,克隆得到了糙皮侧耳新831菌株的乙醛脱氢酶基因poaldh1,并对其进行了测序和初步的生物信息学分析。结果表明,该基因长度为2,016 bp,编码序列长度为1,437 bp,编码478个氨基酸。该基因编码的氨基酸序列具有乙醛脱氢酶中高度保守的10肽序列、催化结构域及谷氨酸活性位点等保守区域。通过蛋白质功能预测和GO分析表明,POALDH1是一种NAD（P）+依赖型的乙醛脱氢酶。利用半定量PCR（SqRT-PCR）对poaldh1基因在双核菌丝期和原基期、与糙皮侧耳原基形成相关的光照、温差刺激条件下以及在非生物胁迫下的差异表达情况进行了测定分析。结果表明,糙皮侧耳poaldh1基因在双核菌丝期及原基期中均有表达且差异显著,原基期的表达量约为双核菌丝期的3倍。在光照及温差刺激下,poaldh1基因均上调表达且差异显著。当糙皮侧耳菌丝暴露在不同浓度的氯化钠及甘露醇时,菌丝的生长均受到抑制且poaldh1基因的表达量均高于对照。综上所述,poaldh1基因可能通过响应外界环境刺激而参与调控原基的形成过程。使用pET22b（+）-Ptac载体进行了原核表达,成功诱导出约为52kDa的POALDH1蛋白,对粗酶液进行乙醛脱氢酶酶活测定,得出该重组菌的乙醛脱氢酶粗酶活为0.58 U/mg。乙醛耐受性实验表明:携带pET22b（+）-Ptac-poaldh1的重组菌比对照菌株具有更高的乙醛耐受性。最后成功改造得到带有糙皮侧耳gpd启动子的真核表达载体pPo-GPD,并构建了poaldh1基因的过表达载体和反义沉默载体,并计划通过农杆菌介导的遗传转化方法将上述质粒转入糙皮侧耳,构建poaldh1基因过表达和沉默突变株。