【摘 要】
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目的探讨经血间充质干细胞(MenSCs)移植改善化疗所致卵巢早衰小鼠卵巢功能的效果和分子机制。方法48只C57BJ雌鼠被随机分成3组:对照组、POF组和干细胞组。环磷酰胺和白消安腹腔注射构建POF小鼠;干细胞组小鼠在化疗药物注射后3d开始鼠尾静脉注射MenSCs。通过检测血清性激素水平、超排卵子数、卵巢湿重评估卵巢功能;采用qRT-PCR定量分析卵巢内生长因子受体结合蛋白10(GRB10)、胰岛素
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目的探讨经血间充质干细胞(MenSCs)移植改善化疗所致卵巢早衰小鼠卵巢功能的效果和分子机制。方法48只C57BJ雌鼠被随机分成3组:对照组、POF组和干细胞组。环磷酰胺和白消安腹腔注射构建POF小鼠;干细胞组小鼠在化疗药物注射后3d开始鼠尾静脉注射MenSCs。通过检测血清性激素水平、超排卵子数、卵巢湿重评估卵巢功能;采用qRT-PCR定量分析卵巢内生长因子受体结合蛋白10(GRB10)、胰岛素样生长因子受体(IGF-1R)、叉头状转录因子O亚家族蛋白3(FOXO3a)、蛋白激酶B(AKT)的mRNA表达;采用Western blotting及免疫组化定量分析卵巢内GRB10、p-FOXO3a、p-AKT等因子的蛋白表达。结果对照组、POF组、干细胞组的血清雌二醇浓度分别为(222.29±35.13)、(90.87±28.76)、(193.24±48.74)pg/mL,3组之间差异有统计学意义(F=19.332,P≤0.001);POF组低于对照组(P≤0.001)和干细胞组(P≤0.001)。对照组、POF组、干细胞组小鼠超排的成熟卵子数分别为(40.00±10.07)、(9.00±7.42)、(24.60±10.24)个,3组之间差异有统计学意义(F=13.792,P=0.001);对照组(P≤0.001)和干细胞组(P=0.021)高于POF组,且对照组高于干细胞组(P=0.023)。Western blotting检测对照组、POF组、干细胞组卵巢内GRB10蛋白条带灰度值分别为1.22±0.05、1.82±0.13、1.10±0.09,3组之间差异有统计学意义(F=94.340,P≤0.001);POF组高于对照组(P≤0.001)和干细胞组(P≤0.001)。3组中p-FOXO3a的蛋白条带灰度值分别为0.80±0.08、0.33±0.06、0.76±0.05,3组之间差异有统计学意义(F=98.673,P≤0.001);POF组低于对照组(P≤0.001)和干细胞组(P≤0.001)。3组小鼠中p-IGF-1R的蛋白条带灰度值分别为0.31±0.10、0.32±0.08、0.42±0.01,3组之间差异有统计学意义(F=3.882,P=0.044);干细胞组p-IGF-1R蛋白含量高于对照组(P=0.023)和POF组(P=0.039)。对照组、POF组、干细胞组小鼠的p-AKT蛋白条带灰度值分别为0.57±0.02、0.51±0.05、0.64±0.03,3组之间差异有统计学意义(F=22.227,P≤0.001);干细胞组蛋白含量高于对照组(P=0.005)和POF组(P≤0.001),对照组高于POF组(P=0.004)。结论MenSCs移植后,可能是通过干细胞旁分泌的胰岛素样生长因子1(IGF-1)与IGF-1R结合,促进p-IGF-1R的表达,激活IGF-1信号通路,促进磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)-AKT-FOXO3a途径下游因子FOXO3a的磷酸化表达,从而促进细胞增殖和原始卵泡发育,改善POF。
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