研究背景和目的:　　 视皮层是视觉的最高级中枢,视觉信息经由视觉通路最终传导到视皮层,再经皮层的分析与综合产生视觉。初级视觉皮层(primary visual cortex V1区)是视觉信号进行初级处理的区域,能够反映出不同视觉刺激模式下视觉信号的的基本特征。　　 视觉诱发电位(visual evoked potential,VEP),是大脑皮层对视觉刺激发生反应的一簇电信号。视觉诱发电位按刺激的方式大致可分为图型刺激和闪光刺激视觉诱发电位(flash visual evoked potential,FVEP)。闪光刺激为弥散的非图形刺激,明暗反差强烈,不需专注注视,包括各种色光的刺激。目前已知,不同色光刺激对大鼠视皮层的影响不同。大鼠对红光刺激不敏感,而其他单色光能使大鼠视皮层场电位发生变化。也有研究表明在大鼠视皮层V1区存在对颜色敏感的神经细胞,通过功能性的磁共振技术证实这些细胞具有对不同颜色刺激的分辨能力。　　 中枢乙酰胆碱为兴奋性神经递质,与许多生理和病理生理相关,胆碱能M型受体阻断剂东莨菪碱可显著降低乙酰胆碱能活性,胆碱能M型受体激动剂卡巴胆碱可显著提高乙酰胆碱活性[3—4]。本实验采用红、绿2种单色光和白光,探讨不同色光刺激对大鼠初级视皮层视觉诱发电位的影响；通过给予胆碱能受体阻断剂和受体激动剂,并结合免疫组织化学,进一步探讨初级视皮层胆碱能神经元在视觉诱发电位诱导中的功能和意义,为视觉脑认知的研究提供一定的实验资料。　　 方法:　　 1、实验动物及分组:健康成年SD大鼠30只,体重220g～280g,雌雄不限。实验分为三组:对照组,卡巴胆碱组,东莨菪碱组。　　 2、电生理记录:大鼠10％水和氯醛麻醉后,于颅骨前囟向后7.0mm,左侧旁开2.0mm(初级视皮层V1区)和前囟前2.0mm,左侧旁开2.0mm处钻孔,分别植入长4mm,直径1.2mm的不锈钢螺钉作为记录电极和参考电极。术后第5天开始实验。实验前,让大鼠在暗箱中适应30 min,继之,分别记录给予红、绿、白光刺激视皮层V1区的诱发电位。记录时间为下午,每次记录约2h。首先,将LED调为白光,调整刺激参数。然后,将LED调为红光或绿光,同样方法描记皮层诱发电位。为避免大鼠视觉疲劳,组间实验间隔10 min。对闪光刺激条件下的视皮层V1区诱发电位主波的波幅(uv)及潜伏期(ms)作定量分析。　　 3、免疫组化:将电生理记录后的对照组和阻断剂(东莨菪碱)组大鼠麻醉,4％多聚甲醛心脏灌注,取出脑组织,石蜡包埋、切片。含有VI区的脑组织切片经脱蜡,抗原修复及血清封闭,分别与抗ChAT抗体(1:100)或抗C-Fos抗体(1:100),4℃孵育过夜。继之,与兔抗山羊IgG(1:250)孵育。阴性对照采用二抗同时进行。　　 4.统计处理所有数据以均值±标准差表示,SPSS10.O统计软件包进行两两比较LSD检验或t检验,以P<0.05表示具有统计学意义。　　 结果:　　 1、闪光刺激诱导V1区产生诱发电位　　 给予白光和绿光刺激可诱发大鼠视皮层V1区产生诱发电位,红光刺激不能引起明确的诱发电位。白光和绿光刺激引起V1区诱发电位的潜伏期和幅值无显著变化。　　 2、胆碱能受体激动剂及阻断剂对V1区诱发电位的影响　　 给予胆碱能受体受体激动剂.卡巴胆碱,白光和绿光刺激可增强V1区诱发电位的幅值；给予胆碱能受体阻断剂-东莨菪碱可抑制大鼠闪光刺激V1区诱发电位的幅值；卡巴胆碱或东莨菪碱对FVEP的潜伏期无明显影响。　　 3、闪光刺激诱导初级视皮层ChAT和c—Fos蛋白的表达　　 白光刺激可引起初级视皮层C—fos蛋白表达增多。与对照组相比较,给予胆碱能受体阻断剂-东莨菪碱,白光刺激可引起初级视皮层神经元胆碱乙酰转移酶表达减少。　　 结论:　　 1.绿光和白光刺激能诱导大鼠视皮层V1区产生诱发电位,而红光刺激不能诱导初级视皮层产生明确的诱发电位。　　 2.胆碱能受体激动剂增强大鼠初级视皮层视觉诱发电位的幅值,而胆碱能受体阻断剂抑制初级视皮层视觉诱发电位的幅值。　　 3.白光刺激可引起初级视皮层C-fos蛋白表达增多。阻断胆碱能M受体,白光刺激引起初级视皮层神经元胆碱乙酰转移酶表达减少。提示中枢乙酰胆碱系统参与闪光刺激诱导的初级视皮层的电活动。