目的研究ATPR(全反式维甲酸衍生物)联合Cox-2抑制剂(Celecoxib(塞来昔布)和Nimesulide(尼美舒利))对下咽癌细胞(Fa Du)增殖和凋亡的影响及其具体分子机制。方法MTT法和流式细胞术法检测Celecoxib、Nimesulide分别联合ATPR对Fa Du细胞增殖能力的影响。流式细胞术和TUNEL凋亡试剂盒检测ATPR的联合用药对Fa Du细胞凋亡的影响。RT-q PCR方法检测Celecoxib和Nimesulide分别联合ATPR对Fa Du细胞p53,cyclin-D1,IκBα,Rb,m RNA表达水平的改变。Western Blot法检测凋亡相关蛋白(caspase家族、Bcl-2、Bax、p53、p21)以及MAPK,NF-κB信号转导通路相关蛋白的表达情况。ATPR联合Cox-2抑制剂对裸鼠成瘤的抑制效果。结果ATPR联合Cox-2抑制剂处理细胞后,MTT结果显示ATPR、Celecoxib和Nimesulide分别对Fa Du细胞增殖有明显的抑制效果,而联合用药的抑制效果要比单独用药的强度大。流式细胞术周期试验结果显示ATPR和Cox-2抑制剂对细胞周期阻滞,而且联合用药组细胞的周期阻滞在G1-G0期的比例要比单独用药和Control组大很多。流式细胞术显示联合用药和单独用药能促进Fa Du细胞的凋亡,使它们早期凋亡和中晚期凋亡的细胞增多,而且联合用药组的促进凋亡效果更明显。RT-q PCR结果显示单独和联合用药使p53、IκBα、Rb等基因的表达增强;使cyclin-D1的表达降低。Western Blot的实验结果说明联合用药促使了p53、p21、Bax、caspase-3、caspase-8、caspase-9等表达水平出现上调,并且下调Bcl-2等蛋白表达水平。MAPK信号通路p38蛋白磷酸化水平显现轻微下调,JNK蛋白的磷酸化水平下调,而ERK蛋白的磷酸化水平未见明显改变。加入JNK/MAPK通路的抑制剂可以抑制Fa Du细胞的增殖而且可以上调凋亡相关蛋白的表达水平。ATPR联合Cox-2抑制剂可以抑制NF-κB信号通路中p65的表达,促进IκBα的表达,p65与IκBα无法分离,NF-κB信号通路被抑制。裸鼠成瘤实验中单独与联合用药能抑制肿瘤的生长,而且联合用药组抑制效果更为明显。结论ATPR联合Cox-2抑制剂通过野生型p53诱导下咽癌Fa Du细胞的细胞周期阻滞和凋亡。ATPR联合Cox-2抑制剂诱导Fa Du细胞的凋亡依赖于内源性和外源性途径的caspase的激活。ATPR联合Cox-2抑制剂会抑制JNK/MAPK和NF-κB信号通路。