论文部分内容阅读
研究背景及目的：近年来发现先天免疫在银屑病的发病中起重要作用，其中pDC的作用得到越来越多关注。pDC是I型干扰素（IFN-α/β）的主要来源。咪喹莫特是TLR7/8的特异性激活剂，与pDC内涵体膜上TLR7特异结合导致IFN-α的大量分泌。研究发现外用咪喹莫特于BALB/c小鼠可以诱导出银屑病样炎症，其作用机理主要是依赖于IFN-α、IL-23/IL-17轴和IL-22，并且认为这是在自然免疫状态下诱导的理想的银屑病小鼠模型。目前银屑病的治疗主要是对症治疗，这些治疗疗程长，不良反应多，患者依从性差。因此有必要进一步探讨患者更容易接受的防治方法。芥菜籽是一种十字花科芸苔属植物的种子。研究发现芥菜籽具有抗炎、抗癌、抗菌等多种生理功能。其作用机理包括抗氧化和清除自由基。我们最近研究证明芥菜籽还具有抗变应性接触性皮炎的作用，但是迄今还未见芥菜籽对银屑病治疗作用的研究报道。本实验通过芥菜籽对咪喹莫特诱导小鼠银屑病样炎症的作用，初步探讨其应用于防治干预银屑病的可能性。方法：1.动物实验：建立咪喹莫特诱导银屑病样炎症模型；观察芥菜籽对咪喹莫特诱导银屑病样炎症的影响，以及腹腔注射NF-κB抑制剂对炎症的影响；2.HE染色研究皮损组织病理改变；3.免疫组化法研究皮损T细胞、pDC及巨噬细胞的浸润分布及皮损iNOS的表达；流式细胞术测定脾脏分离T细胞、pDC及巨噬细胞的构成比变化；4.分光光度法检测外周血浆氧化应激指标SOD、CAT、GSH-PX和MDA5.RT-PCR法检测皮损中IFN-α、IL-17A/F和IL-22mRNA的表达，及ELISA法检测血清IFN-α、IL-17和IL-22的水平。结果：1.芥菜籽显著抑制小鼠银屑病样炎症，校正PASI评分比模型组小鼠明显减低，p<0.05，但是不能完全抑制炎症的出现；2.芥菜籽能减少银屑病样炎症中T细胞、pDC和巨噬细胞等细胞的浸润以及减轻咪喹莫特诱导小鼠脾脏肿大，改变脾脏中CD4+、CD8+T细胞、pDC和巨噬细胞的百分比构成；3.相比正常对照组，模型组小鼠皮损中抗氧化酶活性SOD、CAT和GSH-PX显著降低以及反应脂质过氧化的指标MDA含量显著增高,皮损iNOS的表达增强；芥菜籽显著升高SOD、CAT和GSH-PX的活性，降低MDA含量及皮损iNOS表达；4.相比模型组小鼠，芥菜籽组小鼠皮损中IFN-α、IL-17A/F和IL-22的mRNA相对量及血清IFN-α、IL-17和IL-22水平显著降低，动态分析中发现从外用咪喹莫特第2-4天起就有显著差异，p<0.05；5.芥菜籽能抑制银屑病样炎症皮损中NF-κB的表达；腹腔注射PDTC可以减轻银屑病样皮炎，并且血浆SOD、CAT和GSH-PX活性及MDA含量、皮损IFN-α、IL-17A/F和IL-22的mRNA相对量与芥菜籽组小鼠无显著差别，p>0.05；mRNAs的含量高于对照组小鼠，差异有统计学意义，p<0.01。结论：芥菜籽能显著抑制咪喹莫特诱导小鼠银屑病样炎症，可以抑制其炎症细胞浸润、氧化应激状态及IFN-α、IL-17和IL-22等细胞因子。其抗炎、抗氧化及调节免疫的作用可能与抑制NF-κB通路的作用有关，为今后应用芥菜籽进行防治干预银屑病的研究奠定了基础。