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钙敏感受体是G蛋白偶联受体,它是通过激活磷脂酶C系统来引起细胞内的游离钙离子的浓度([Ca2+]i)的升高,并且主要参与机体内钙离子的稳态的维持。而[Ca2+]i的变化又是触发心肌肥大的始动因素,但钙敏感受体在心肌纤维化中的作用与机制,至今为止国内外仍未见报道。 目的:观察钙敏感受体在大鼠的心肌肥大动物的模型中的表达变化规律;并探讨钙敏感受体促进心肌成纤维细胞增殖的相关机制。 方法:(1)雄性Wistar大鼠被随机分为对照组,心肌肥大模型组,钙敏感受体激动剂组钙敏感受体抑制剂组。其中心肌肥大模型组用异丙肾上腺素制备,激动剂组和抑制剂组在给予异丙肾上腺素后每隔一天尾静脉注射一次。通过超声检测各组大鼠左室射血分数和室间隔厚度等的血流动力学的变化,以此作为判定心肌肥大的指标;HE,电镜观察心肌形态学损伤情况;MASSON染色观察心肌细胞纤维化情况。(2)提取Wistar乳鼠(出生后3-7天)心肌成纤维细胞,培养48h后,将其分为以下四组进行干预:对照组,Ca2+组,钙敏感受体激动剂组,钙敏感受体抑制剂组。Western Blot检测心肌成纤维细胞相关蛋白表达水平。 结果:(1)钙敏感受体在心肌成纤维细胞中有所表达,而细胞外钙离子和钙敏感受体激动剂可诱导细胞内钙离子的浓度的改变。(2)钙敏感受体激动剂和Ca2+可以增加细胞内钙离子浓度,并能诱导心肌成纤维细胞增殖和迁移。(3)Western Blot检测心肌成纤维细胞相关蛋白表达水平,发现Ca2+组和钙敏感受体激动剂组中钙敏感受体、金属基质蛋白酶-2、金属基质蛋白酶-9、平滑肌肌动蛋白的蛋白表达均高于对照组和钙敏感受体抑制剂组,而金属基质蛋白酶抑制剂-4蛋白表达低于对照组和钙敏感受体抑制剂组。(4)皮下注射异丙肾上腺素4周后,心肌肥大指数增加。MASSON染色显示异丙肾上腺素4周,钙敏感受体激动剂干预的异丙肾上腺素4周组纤维化区域明显大于对照组。Western Blot检测相关蛋白,异丙肾上腺素4周组和钙敏感受体激动剂干预的异丙肾上腺素4周组的钙敏感受体、金属基质蛋白酶-2、金属基质蛋白酶-3和金属基质蛋白酶-9蛋白表达高于对照组和钙敏感受体抑制剂干预的异丙肾上腺素4周组 结论:(1)首次证实钙敏感受体在心肌成纤维细胞中有功能性表达,钙敏感受体激动剂可调控金属基质蛋白酶-2、金属基质蛋白酶-9、平滑肌肌动蛋白和金属基质蛋白酶抑制剂-4表达;(2)钙敏感受体参与异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌纤维化的形成。