背景骨肉瘤是常见的原发性骨恶性肿瘤,好发于青少年,恶性程度高,远处转移早,单纯截肢手术5年生存率低于20%。在国内,原发性骨恶性肿瘤并非常见,占恶性肿瘤的2-3%,占所有恶性肿瘤死亡人数的1.6%。上世纪70年代,新辅助化疗的开展,术前给予1-2个疗程化疗,对术后切除的标本进行分区域肿瘤细胞坏死率检测,根据坏死率检测结果指导术后化疗。骨肉瘤患者的5年生存率提高至目前的60%-70%,部分患者还可以长期无瘤生存。随着影像学诊断的完善、外科技术的改进、材料科学的发展以及骨肉瘤发生发展病因学认识的加深,骨肉瘤保肢手术的安全性和保留的肢体功能也都得到了明显提高。骨肉瘤是骨的原发恶性肿瘤,肿瘤细胞可以产生骨样或不成熟骨,影响其临床行为分类以及治疗方案。骨肉瘤患者生存率的进一步提高需要找到进过验证的的预后因子以及更好的治疗药物。这些均要求在骨肉瘤分子、基因水平做进一步研究。近来研究表明,诱导肿瘤细胞分化的化疗药物可以通过与DNA周围调控转录水平的蛋白相互作用调节细胞分化,如视黄醛类分化诱导剂。全反式维甲酸(ATRA)是合成的非芳香族维甲酸,具有很强的诱导肿瘤细胞分化作用。干扰素-β(IFN-β)通过刺激生长抑制因子的合成或激活凋亡来抑制细胞生长。虽然干扰素本身具有很强的抑制细胞生长活性,但是许多肿瘤细胞对干扰素介导的细胞生长停滞并不敏感。而干扰素敏感差的肿瘤细胞,使用全反式维甲酸(维生素A衍生物)处理后,细胞抑制作用显著增强。信号传导子和转录激活子3(STAT3)是由人基因STAT3编码合成的转录因子。在正常组织内,STAT3的表达受到严格的调控。然而,在很多人恶性肿瘤组织中可以检测到异常的STAT3表达。异常的STAT3表达在肿瘤的生存、增殖、血管形成及远处转移过程中起到重要的作用。经活化的异常的STAT3能够促使恶性肿瘤细胞无限制的生长和生存。这与其下游目的基因(如survivin, Bcl-xL, Bcl-2, Mcl-1, c-Myc and cyclin Dl)的异常表达调节关联。另外,一些研究者报道应用RNA干扰技术或者药物诱导使STAT3低表达,可以抑制肿瘤的增殖,并能诱导凋亡。因此,STAT3很有可能成为恶性肿瘤治疗的靶向位点。GRIM-19编码合成一约16kDa的蛋白质分子,GRIM-19定位于人染色体19p13.2.RA和IFN-α/-β均可引起GRIM-19mRNA表达。但是,IFN/RA结合后可以引起基因明显表达。异常的GRIM-19表达可以引起细胞死亡并减轻IFN-β/RA介导的细胞凋亡活性。GRIM-19被作为一个细胞死亡激活因子分离出来,以阐明IFN-3和维甲酸引起细胞死亡的机制。反义切除GRIM-19基因可使IFN-β和维甲酸抑制肿瘤细胞的活性降低。GRIM-19抑制转录是通过STAT3活化接到的,而非STAT1. GRIM-19不抑制受体介导的STAT3活化,也不阻止其结合与DNA的能力。基因突变分析显示GRIM-19可以结合于STAT3活化区域,特别是S727残基。活化的STAT3上调抗凋亡基因,促使肿瘤细胞存活。GRIM-19对STAT3的抑制作用表明其是一个抑癌基因,可以作为一个生物基因治疗的靶点。目的观察ATRA联合IFN-β对人骨肉瘤细胞株MG-63的生长抑制作用,以及对基因GRIM-19和原癌基因STAT3的表达的影响和两者之间的关系,为骨肉瘤的基因治疗提供可能的位点。方法MTT法检测不同药物浓度的ATRA/IFN-β,单用或联合应用对人骨肉瘤细胞株MG-63的增殖抑制率；流式细胞仪AnnexinV-FITC/PI法检测人骨肉瘤细胞株MG-63的凋亡情况；RT-PCR法检测经ATRA、IFN-β单用或联合应用干预后的人骨肉瘤细胞株MG-63中STAT3与GRIM-19基因的扩增情况；Western blot法检测经如上干预后人骨肉瘤细胞株MG-63中STAT3与GRIM-19蛋白的表达情况。结果ATFA和IFN-β单用或联合应用均可抑制MG-63的增殖,呈浓度依赖性并与作用时间有关；联合应用抑制作用明显增强,与其他组比较有统计学意义(p＜0.05)。ATRA.、IFN-β单独作用,可诱导MG-63凋亡；联合应用时,诱导凋亡作用显著增强。ATRA联合IFN-β作用,GRIM-19mRNA的表达明显增强(1.62±0.095),GRIM-19蛋白明显升高(1.85±0.060),与其他组比较有统计学意义(p＜0.01)。STAT3mRNA的表达明显降低(0.12±0.032),STAT3蛋白明显降低(0.54±0.075),与其他组比较有统计学意义(p＜O.01)。结论ATRA/工FN-β作用,可明显抑制MG-63的增殖并诱导凋亡,其机制可能是可诱导GRIM-19高表达,特异性结合于STAT3的转录活性区域,使原癌基因STAT3的表达降低。