分区式组织工程脊髓导管辅加NT-3修复大鼠T8完全横断损伤模型实验

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目的探讨分区式组织工程脊髓导管辅加NT-3在修复大鼠T8全横断损伤模型中的修复作用。方法将分区式组织工程脊髓导管、适量的聚乙醇酸纤维及NT-3,桥接到成年大鼠急性T8脊髓完全横断损伤模型(5mm完全缺损)中,设置相应的对照组,从行为学、电生理学、形态学、影像学等方面观察损伤脊髓修复的效果。结果缺损组脊髓两残端被致密的结缔组织包裹,桥接各组中桥接物与大鼠脊髓两残端在解剖结构上有了不同程度的连接;斜板法及BBB评分显示各组大鼠后肢运动功能、后肢肌力部分恢复,NT-3组2w、12w评分高于其他实验组(p<0.05);运动诱发电位(motor evoked potential, MEPs)检测显示NT-3组刺激大鼠的皮层、损伤下段在腓肠肌表面记录到MEPs,导管+聚乙醇酸纤维+NT-3组皮层MEPs振幅明显高于导管+NT-3组(p<0.05),且损伤下段的MEPs潜伏期也显著较短(p<0.05);免疫组化方法显示NT-3组在导管中间能找到染色阳性的再生神经纤维,再生神经纤维能相对有序生长,缠绕成团现象不明显;快蓝染色显示在导管+聚乙醇酸纤维+NT-3组降解的导管中间段,再生神经纤维相对有序生长,无明显缠绕成团现象;桥接各组电镜下能找到一定数量的有髓神经纤维;通过自制线圈,应用临床3.0T磁共振扫描仪能在大鼠活体内较直观的观察脊髓损伤修复情况。结论1.桥接各组中桥接物与大鼠脊髓两残端在解剖结构上有了不同程度的连接;2.行为学检测结果显示各组大鼠后肢运动功能、后肢肌力得到部分恢复,NT-3组恢复相对较好;3.电生理检测结果显示NT-3组刺激大鼠的皮层、损伤下段在腓肠肌内均记录到MEPs,说明在一定程度上恢复了电生理功能;4.组织学上显示分区式人工脊髓导管在一定程度上阻止了脊髓损伤后再生神经纤维互相缠绕成团的现象,同时对再生纤维延伸起到引导作用;5.“分区式人工脊髓导管+聚乙醇酸纤维+NT-3”治疗方案可以使再生的神经纤维较快的生长并与损伤远侧端建立相应的功能联系,为治疗脊髓损伤提供具有潜在意义的组合方案。6.通过自制线圈,应用临床磁共振扫描仪能在大鼠活体内较直观的观察脊髓损伤的修复情况。
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