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本课题选用骨髓瘤RPMI8226细胞为研究对象,以龙葵总碱为被试对象,以RPMI8226细胞内Notchl为主要作用环节,探讨龙葵总碱对骨髓瘤RPMI8226细胞的凋亡现象以及对Notchl的影响。目的：1、观察龙葵总碱对骨髓瘤细胞株RPMI8226细胞的凋亡的作用,确定龙葵总碱的最适浓度和最适时间。2、研究龙葵总碱作用于RPMI8226骨髓瘤细胞对Notchl信号通路的影响,尝试阐述抑制该细胞增殖、诱导细胞凋亡的机制。方法：1、培养RPMI8226细胞,每2-3天传代一次,选取对数生长期细胞进行实验。2、MTT法探索龙葵总碱抑制RPMI8226细胞生长活性的浓度和作用时间细胞加入龙葵总碱,设置800、400、200、100、50、25、12.5、6.25、3.125mg／L共9个浓度梯度,另设立空白对照组,每组5个复孔。继续培养。分别于24、48、72小时,以MTT法测定龙葵总碱对细胞生长活性的影响。3、Annex in V/PI流式细胞分析法检测细胞凋亡各组细胞加药48h经处理后于流式细胞仪(FACS)检测细胞凋亡。获得细胞凋亡数据后用ModFitLT软件进行细胞凋亡相对定量分析。4、RT-PCR法检测Notchl基因表达：分别取经过龙葵总碱各时相干预的细胞,提取出各时相细胞的mRNA,通过逆转录技术,合成各时相细胞cDNA,通过设计的人Notchl基因的引物,PCR扩增出Notchl基因序列,并以GAPDH基因做内参,运用软件检测出各时相干预的细胞Notchl基因的表达量。5、统计学分析SPSS18.0软件分析,数据以均数±标准差表示,相关样本非参数方差分析,P<0.05表示差异有统计学意义,P<0.01表示差异有高度统计学意义,P>0.05表示差异无统计学意义。结果：1、龙葵总碱抑制RPMI8226细胞株的增殖,呈时间剂量依赖性。25mg／L龙葵总碱处理RPMI8226细胞48h后,RPMI8226细胞的生长出现明显的抑制作用。2、Annexin V/PI法证实了龙葵总碱可以诱导人多发性骨髓瘤细胞株RPMI8226凋亡。3、RT-PCR结果显示龙葵总碱可下调Notchl的表达,与一定浓度内龙葵总碱的作用浓度和时间相关。结论：1、龙葵总碱可抑制人骨髓瘤细胞株RPMI8226细胞增殖,在一定范围内呈时间和剂量依赖性。2、Annex in V/PI法证实了龙葵总碱可以诱导人多发性骨髓瘤细胞株RPMI8226凋亡。3、龙葵总碱对骨髓瘤细胞株RPMI8226细胞中Notchl表达有抑制作用。