目的：目前心血管疾病是威胁人类生命的主要疾病之一。其中血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell, VSMC)由中膜迁移到内膜下间隙并异常增生是动脉粥样硬化、高血压、血管成形术后再狭窄、冠心病等疾病发生、发展的重要环节之一。血小板源性生长因子(platelet-derived growth factor, PDGF)是一种重要的促细胞有丝分裂剂,同时具有趋化活性和分裂活性,它可以诱导VSMC从中膜迁移到内膜。PDGF-BB是目前已知最强的VSMC体外趋化剂。VSMC从中膜迁移到内膜的前提是需要将细胞周围的细胞外基质(extracellular matrix, ECM)降解掉。已知基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases, MMPs)是一组锌离子依赖的内肽酶家族,由VSMC、巨噬细胞及其它一些细胞产生。它可以降解大部分ECM,为VSMC的迁移扫清道路。其中尤其以MMP-2最为重要,它可以降解ECM的主要成分,从而促进VSMC的迁移。Rho激酶(ROCK)属于丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶家族成员之一,也是目前功能研究最为清楚的Rho下游靶效应分子。它有两种亚型,分别是ROCKⅠ和ROCKⅡ。大量研究证明,Rho/ROCK信号通路参与了细胞多种生理功能的调节,例如,细胞迁移、细胞增殖、细胞粘附、细胞骨架重组以及其他炎症反应,而这些细胞功能又与许多心血管疾病的发生、发展有密切关系。ROCK的两种亚型氨基酸序列具有65%的同源性,其中两者激酶区的同源性高达92%。因此,一般研究者认为两者在细胞内的功能相同。但是近年来研究发现ROCKⅠ和ROCKⅡ在某些细胞中具有不同的磷酸化底物,提示两者的作用机制可能会有不同。目前,ROCK的两种亚型在血管平滑肌细胞迁移中的作用机制是否相同尚不明确。本文旨在研究PDGF介导ROCK亚型(ROCKⅠ和ROCKⅡ)对大鼠胸主动脉平滑肌细胞(A7r5)基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达及活性的影响。方法：(1)利用明胶酶谱法检测MMP-2蛋白的活性;(2)利用RNA干扰技术,通过脂质体转染ROCK亚型的siRNA,使ROCKⅠ或ROCKⅡ基因表达下调,并检测基因下调后蛋白表达水平；(3)使用免疫印迹法(western blot)检测MMP-2蛋白的表达;(4)利用Boyden小室法,观察ROCKⅠ和ROCKⅡ蛋白表达下调后及ROCK抑制剂Y-27632对PDGF诱导的A7r5细胞迁移的影响；(5)利用细胞免疫荧光方法观察细胞骨架变化情况。结果：(1)明胶酶谱显示PDGF呈浓度依赖性增加血管平滑肌细胞MMP-2的活性,并且在20ng/ml的时候达到高峰；(2)siRNA转染后ROCKⅠ和ROCKⅡ分别表达下调79.8%和70.1%；(3)PDGF介导下ROCKⅠ和ROCKⅡ表达下调均抑制MMP-2的表达；(4)PDGF介导下ROCKⅠ和ROCKⅡ表达下调均抑制MMP-2的活性；(5)ROCKⅠ下调抑制VSMC迁移,ROCKⅡ下调抑制作用不明显；(6)PDGF诱导血管平滑肌细胞伪足明显增加,转染ROCKⅠ和ROCKⅡsiRNA的细胞伪足明显减少,PDGF诱导下转染ROCKⅠsiRNA的细胞伪足增加不明显,转染ROCKⅡsiRNA的细胞伪足增加明显。结论：(1)ROCKⅠ在血管平滑肌细胞的迁移中起主导作用,而ROCKⅡ对迁移影响不明显。(2)ROCKⅠ和ROCKⅡ蛋白表达下调均抑制MMP-2的表达和活性,MMP-2可能是Rho/ROCK信号通路影响VSMC迁移的下游分子。